АЛЬТЕРНАТИВНЫЙ СПЛАЙСИНГ ГЕНА TLR4 В МИЕЛОИДНЫХ КЛЕТКАХ ПРИ ВОЗДЕЙСТВИИ ЭНДОТОКСИНОМ

Аннотация:

Одним из ключевых этапов внутриклеточной сигнализации липополисахаридного эндотоксина (LPS) является его связывание с рецептором TLR4, расположенным на поверхности мононуклеаров и нейтрофилов и относящимся к семейству Toll-like белков. В настоящее время выявлено несколько вариантов TLR4, которые проявляют, возможно, различную функциональную активность. Целью настоящего исследования был анализ альтернативного сплайсинга TLR4 при стимуляции клеток эндотоксином. В работе использовали моноциты крови человека и мышиную клеточную линию J774 — макрофаги, инкубированные с LPS в течение 1—24 ч. Экспрессию мРНК определяли с помощью обратнотранскриптазной ПЦР. Обнаружено 4 варианта мРНК TLR4 человека (hTLR4), образующиеся в результате альтернативного сплайсинга, и установлены размеры каждого фрагмента. Наибольшая степень экспрессии выявлена для мРНК hTLR4 с экзонами 1-2-3-4 и 1-3-4. Поскольку экзон 2 содержит стоп-кодон, мы предполагаем, что белку, выполняющему функцию рецептора эндотоксина, соответствует генный транскрипт 1-3-4. Кроме того, 2 из 4 найденных последовательностеп hTLR4 клонированы, и синтезированы специфические праймеры. Для мышиного tlrt (mtlrt) показаны 2 варианта мРНК, один из которых соответствует альтернативному белку с защитными функциями. Уровень экспрессии этой формы mtlrf был снижен относительно "нормальной" последовательности мРНК mtlr4. Таким образом, полноценному белку hTLR4 может соответствовать последовательность мРНК 1-3-4, однако функции и роль этой и других транскриптов hTLR4 подлежат дальнейшему изучению.

Авторы:

Издание: Молекулярная медицина
Год издания: 2003
Объем: 6с.
Дополнительная информация: 2003.-N 3.-С.49-54
Просмотров: 28