ИДЕНТИФИКАЦИЯ НОВЫХ СВЯЗЫВАЮЩИХ ПАРТНЕРОВ ОПУХОЛЕВОГО СУПРЕССОРА PTEN МЕТОДОМ ДВУГИБРИДНОЙ СИСТЕМЫ ДРОЖЖЕЙ (СТАТЬЯ НА АНГЛИЙСКОМ ЯЗЫКЕ)

Аннотация:

Цель: идентификация новых партнеров фосфатазы PTEN. Методы: использован метод двугибридной системы дрожжей. Сконструированные байт-конструкты, содержащие С-концевой участок, дикую, мутантную активированную и неактивную dead-формы, проверены в тестах на экспрессию, проникновение в ядро и самоактивацию с использованием стандартного протокола Duplex А системы. Выполнен двугибридный скрининг кДНК библиотек рака кишечника, HeLa и эмбриона мыши с последующим отбором позитивных клонов методом полового слияния. Последовательности идентифицированы с помощью сиквенс-анализа и поиска гомологии в базах данных. Результаты: скрининг кДНК библиотек с помощью полноразмерной формы PTEN и его С-концевого домена позволил отобрать 43 положительных клона, подтвержденных методом полового слияния. Анализ последовательностей выявил, что два из них кодируют АЕВР1 (Adipocyte Enhancer Binding Protein 1). Выводы: согласно нашим данным, взаимодействие между PTEN и АЕВР1 опосредовано их С-концевым и N-концевым участками соответственно. Функциональное значение PTEN-AEBP1 взаимодействия изучается.

Авторы:

Издание: Экспериментальная онкология
Год издания: 2004
Объем: 5с.
Дополнительная информация: 2004.-N 1.-С.15-19
Просмотров: 29