ДИНАМИКА ШАПЕРОННЫХ КОМПЛЕКСОВ HSP70 С БЕЛКАМИ-ПОМОЩНИКАМИ HDJ1 И BAG1 В РЕАКЦИИ КЛЕТОК ЭРИТРОЛЕЙКЕМИИ ЧЕЛОВЕКА К562 НА ТЕПЛОВОЙ СТРЕСС

Аннотация:

Значительную роль в защите клеток от неблагоприятных факторов играет основной белок теплового шока с мол. массой 70 кДа — Hsp70. Его защитная активность во многом обусловлена способностью восстанавливать правильную конформацию поврежденных или вновь синтезированных полипептидов. В выполнении этой функции шаперону Hsp70 помогают белки Hdj1 и Bag1, позволяющие ему производить циклы связывания—высвобождения белков-мишеней. Нами была поставлена цель исследовать взаимодействие кошаперонов Hdj1 и Bag1 с основным шапероном Hsp70 в системе in vivo. Накопление Hsp70 в клетках эритролейкемии человека К562 стимулировали термической обработкой (43 градуса С, 60 мин) и в определенные сроки после нагрева отбирали пробы для биохимического и микроскопического анализов. Результаты иммуноблотинга показали, что в клетках, подвергнутых нагреванию, количество и Hsp70, и Hdj1 возрастает и находится на высоком уровне в течение 24 ч, после чего снижается. Период, характеризовавшийся значительными изменениями концентрации Hsp70, был разбит на несколько этапов, на которых выявлялись комплексы шаперона с белками Hdj1 и Bag1. Из данных перекрестной иммунопреципитации с последующим иммуноблотингом и конфокальной микроскопии следует, что на ранних этапах реакции клеток на тепловую обработку доминирует связывание Hsp70 с Hdj 1; позднее выявляются комплексы преимущественно с белком Bag1. Это говорит о динамичности шаперонных комплексов, образующихся при развитии реакции на стресс, как по их составу, так и по локализации в клетке.

Авторы:

Издание: Цитология
Год издания: 2004
Объем: 8с.
Дополнительная информация: 2004.-N 7.-С.620-627
Просмотров: 38