ИССЛЕДОВАНИЕ МИКРОСОМ КЛЕТОК ПЕЧЕНИ МЫШИ МЕТОДАМИ ПРОТЕОМНОГО АНАЛИЗА

Аннотация:

Выделены и охарактеризованы высокоочищенные препараты мембран клеток печени мыши. Получены 1D- и 2D-электрофореграммы и на их основе проведен сравнительный анализ белкового состава микросом и их "теней" (мембраны, очищенные от "балластных" белков) клеток печени до и после введения мышам фенобарбитала (индуктор цитохромов Р450). Разработанные методы и подходы позволили выявить до 1000 белков на 2D-электрофореграммах исследованных образцов мембран микросом клеток печени. В результате индукции в области 45-60 кДа (соответствующей молекулярному весу цитохромов Р450) обнаружено около 30 новых белков; в области 17 кДа (соответствующей молекулярному весу цитохрома b5) появилось 4 дополнительных белковых пятна и по всей области электрофореграммы "исчезло" 20 белков. При сравнении 2D-электрофореграмм микросом и "теней" в последних обнаружено уменьшение содержания растворимых белков. Разделение белков теней микросом методом одномерного электрофореза и последующий массспектрометрический анализ позволили идентифицировать цитохромы Р450. Полученные в данной работе результаты показали эффективность использования комбинации различных методов протеомного анализа (одномерный и двумерный электрофорез, масс-спектрометрия, биоинформатика, ферментная активность) для изучения биологического материала тканей животных, что в последующем будет использовано для инвентаризации цитохромов Р450 в различных тканях человека.

Авторы:

Издание: Биомедицинская химия
Год издания: 2004
Объем: 9с.
Дополнительная информация: 2004.-N 4.-С.367-375
Просмотров: 35