КОЛИЧЕСТВЕННЫЙ БАЛАНС МЕЖДУ Hsp70 И ЕГО КОШАПЕРОНАМИ Hdjl И Bagl ОПРЕДЕЛЯЕТ ЕГО СУБСТРАТ-СВЯЗЫВАЮЩУЮ АКТИВНОСТЬ

Аннотация:

Одной из наиболее эффективных систем защиты клеток от неблагоприятных факторов является основной белок теплового шока с мол. массой 70 кДа — Hsp70. Его защитная активность во многом обусловлена способностью восстанавливать правильную конформанию поврежденных или вновь синтезированных полипептидов. В выполнении этой функции шаперону Hsp70 помогают белки Hdjl и Bagl, позволяющие ему производить циклы связывания—высвобождения белков-мишеней. Нами была поставлена цель исследовать взаимодействие кошаперонов Hdjl и Bagl с основным шапероном Hsp70 в системе in vitro. Накопление Hsp70 и Hdjl в клетках эритролейкемии человека К 562 стимулировали термической обработкой (43 °С, 60 мин), после чего измеряли количество шаперонов с помощью иммуноблотинга и ИФА в определенные моменты реакции клеток на тепловой шок. Произведенное с помощью оригинальной методики исследование шаперонной активности Hsp70 в экстрактах, приготовленных из клеток в эти моменты, вместе с результатами по модуляции такой активности экзогенно добавленными кошаперонами и их частями позволило сделать вывод о том, что изменения шаперонной активности Hsp70 регулируются его количественным соотношением с кошаперонами, в особенности с Hdjl, при этом количество АТФ является критичным для выполнения Hsp70 его шаперонной функции. Высокоаффинные к Hsp70 пептиды кошаперонов Hdjl и Bagl способны угнетать его шаперонную активность, что подтверждает возможность такого подхода в исследовании функции Hsp70 на клеточном и организменном уровнях.

Авторы:

Издание: Цитология
Год издания: 2005
Объем: 10с.
Дополнительная информация: 2005.-N 3.-С.220-229
Просмотров: 24