КОЛИЧЕСТВЕННЫЙ АНАЛИЗ СИГНАЛОВ ФЛЮОРЕСЦЕНТНОЙ ГИБРИДИЗАЦИИ IN SITU (FISH) ДЛЯ МОЛЕКУЛЯРНО-ЦИТОГЕНЕТИЧЕСКОЙ ДИАГНОСТИКИ

Аннотация:

Молекулярно-цитогенетическая диагностика с помощью флюоресцентной гибридизации in situ (FISH) является необходимым методом идентификации хромосомных аномалий в различных тканях организма. Необходимость метода FISH как для прикладных целей, так и для фундаментальных исследований в области генетики человека неоднократно отмечалась в литературе. В настоящее время данный метод рассматривается как один из основных при диагностике численных и структурных хромосомных аномалий у человека в пре- и постнатальном периоде развития. Он также применяется при исследованиях низкопроцентного мозаицизма по численным хромосомным аномалиям в различных тканях (спонтанные абортусы, клетки кожи, мозга, мышц и крови), при изучении онкологических заболеваний, анатомии клетки, транскрипционной активности генома и других эпигенетических феноменов. Основным преимуществом FISH по сравнению со стандартными цитогенетическими методами является возможность идентификации хромосомных аномалий в некультивированных клетках, что является крайне ценным для пренатальной и преимплантационной диагностики, а также онкогенетических исследований. Несмотря на то что история применения метода FISH насчитывает более 20 лет, в настоящее время остается ряд нерешенных методических вопросов, связанных в первую очередь с корректной интерпретацией полученных результатов при проведении молекулярно-цитогенетической диагностики. В качестве одного из возможных путей решения данной проблемы можно предложить использование метода количественной оценки FISH сигналов. Учитывая ранее приобретенный опыт в области создания коллекции ДНК-проб, маркирующих гипервариабельные последовательности ДНК генома человека, а также разработки программного обеспечения для молекулярно-цитогенетической диагностики, можно предположить, что использование цифрового анализа изображения в значительной степени способствует оптимизации метода FISH для диагностики различных форм генетической патологии. Для усовершенствования молекулярно-цитогенетической диагностики мы разработали метод количественной оценки FISH сигналов, о котором пойдет речь в данной статье; помимо этого мы проанализировали возможности применения разработанного метода, тестированного на образцах лимфоцитов периферической крови, нейронов головного мозга, плаценты и хориона.

Авторы:

Издание: Клиническая лабораторная диагностика
Год издания: 2005
Объем: 4с.
Дополнительная информация: 2005.-N 11.-С.33-36
Просмотров: 155