ВЫДЕЛЕНИЕ КОМПЛЕКСА БЕЛКОВ ВИРУСА КЛЕЩЕВОГО ЭНЦЕФАЛИТА МЕТОДОМ АФФИННОЙ ХРОМАТОГРАФИИ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ МОНОКЛОНАЛЬНЫХ АНТИТ1 К БЕЛКАМ NS5 И NS3

Аннотация:

Вирус клещевого энцефалита (ВКЭ), представитель семейства Flaviviridae, является возбудителем опасного заболевания центральной нервной
системы человека. Актуальность исследований
флавивирусов обусловлена их постоянной циркуляцией в природных очагах и периодическими
вспышками заболеваний. Вирусная геномная
РНК положительной полярности кодирует 3
структурных и 7 неструктурных белков. 2 самых
больших неструктурных белка флавивирусов NS5
и NS3 высококонсервативны среди флавивирусов
и содержат пептиды с высоким содержанием положительно заряженных аминокислот, способных
взаимодействовать с полианионами РНК [1]. Кроме того, белок NS5 содержит трипептид GDI
наруженный во всех известных репликаза
Очищенный рекомбинантный белок NS5 об;
РНК-зависимой РНК-полимеразной акт
стью. Продуктом реакции являются минус
РНК, комплементарные геномной РНК фла
русов [121. Однако диссоциация NS5 от реп
тивного комплекса на поздней стадии инф'
не приводит к потере РНК-полимеразной i
ности in viti-o [3]. Следовательно, данный <
возможно, входит в состав репликативного
плекса на ранней стадии инфекции, что noi
методом аутокаталитической аффинной мо
кации реакционноспособными аналогами инициирующих субстратов [6, 7]. Показано множественное посттрансляционное форфорилирование
NS5 флавивирусов по аминокислотным остаткам
серина [4]. NS3 и малые неструктурные белки
флавивирусов связаны с мембранами эндоплазматического ретикулума в перинуклеарной области
и находятся в субклеточной фракции с репликазной активностью [9]. Белок NS3 содержит геликазный домен [14] и может участвовать в инициации репликации плюс-цепей РНК на поздней стадии инфекции [7, 8]. Участие клеточных белков в
репродукции флавивирусов не доказано, однако
существование гена устойчивости к флавивирусной инфекции у мышей [II] и отдельных популяций людей может объясняться отсутствием клеточной субъединицы репликативного комплекса у
устойчивых к инфекции особей.
Цель настоящей работы состояла в выделении
неструктурных белков NS5 и NS3 ВКЭ методом
аффинной хроматографии и исследовании их
свойств.

Авторы:

Издание: Вопросы вирусологии
Год издания: 1998
Объем: 3с.
Дополнительная информация: 1998.-N 1.-С.36-38
Просмотров: 91