С-КОНЦЕВЫЕ САЙТЫ КАЛЬДЕСМОНА УПРАВЛЯЮТ ЦИКЛОМ ГИДРОЛИЗА АТФ, СДВИГАЯ ПРОМЕЖУТОЧНЫЕ СОСТОЯНИЯ АКТОМИОЗИНА К СЛАБЫМ ФОРМАМ ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ МИОЗИНА С АКТИНОМ

Аннотация:

С помощью метода поляризационной флуориметрии в теневых мышечных волокнах, содержащих тропомиозин, исследовали влияние кальдесмона (CaD) и рекомбинантных пептидов CaDHl (остатки 506—793), CaDH2 (остатки 683—767), CaDH12 (остатки 506—708), Cgl (остатки 658—756) и 658С (остатки 658—793) на ориентацию и подвижность флуоресцентного зонда 1.5-IAEDANS, специфически связанного с Cys-707 субфрагмента-1 (S1) миозина в отсутствие нуклеотида и в присутствии MgADP, MgAMP-PNP, MgATPyS или MgATP. Показано, что при моделировании различных промежуточных состояний актомиозина ориентация и подвижность диполей красителя изменяются дискретно, что указывает на многоступенчатое изменение структурного состояния головки миозина в цикле гидролиза АТФ. Максимальные различия в ориентации зонда на 7° и его подвижности на 30 % были обнаружены между актомиозином в присутствии MgATP и MgADP. Актинсвязывающие сайты кальдесмона С и В' ингибируют формирование сильносвязанных состояний актомиозина, тогда как сайт В активирует формирование этих состояний актомиозина. Предполагается, что в цикле гидролиза АТФ взаимодействие миозина с актином инициирует зависимое от нуклеотида вращение моторного домена головки миозина и изменение ее подвижности. С-концевые актинсвязывающие сайты кальдесмона управляют циклом гидролиза АТФ, сдвигая равновесие от сильных к слабым формам связывания миозина с актином.

Авторы:

Издание: Цитология
Год издания: 2006
Объем: 10с.
Дополнительная информация: 2006.-N 1.-С.9-18
Просмотров: 21