МУЛЬТИПЛЕКСНАЯ ПЦР В РЕЖИМЕ РЕАЛЬНОГО ВРЕМЕНИ ДЛЯ БЫСТРОГО ВЫЯВЛЕНИЯ ЭНТЕРОВИРУСОВ, АДЕНОВИРУСОВ И ВИРУСА ГЕПАТИТА А В КЛИНИЧЕСКИХ ОБРАЗЦАХ

Аннотация:

Разработан метод мультиплексной ПЦР с флуоресцентной детекцией в режиме реального времени с внутренним положительным контролем (ВПК) для одновременного определения аденовирусов (АВ), энтеровирусов (ЭВ) и вируса гепатита А (ВГА). Подобраны праймеры и меченные различными флуоресцентными красителями (FAM, R6G, ROX и Cу5) зонды, высокоспецифично выявляющие в ходе ПЦР до четырех различных типов РНК (ДНК) в одной пробирке. Чувствительность и специфичность метода оценивали с использованием культуральных штаммов ЭВ 8 серотипов, АВ 5 серотипов и 2 клинических образцов, содержащих вирус ГА. Чувствительность определения полиовирусов типов 1, 2 и 3 в мультиплексной реакции составила 0,5 — 1 ТЦЦ50 на реакционную смесь. При анализе 30 клинических образцов методами мультиплексной ПЦР с ВПК и без ВПК и моноспецифической ПЦР результаты, полученные методом мультиплексной ПЦР с ВПК, на 86,7% совпали с результатами культурального метода, а мультиплексной ПЦР без ВПК и моноспецифической ПЦР — на 100%. Метод может быть использован для диагностики кишечных вирусных инфекций, а также для определения степени вирусной контаминации воды. Промежуточным результатом настоящей работы явилась разработка методов количественной оценки РНК ВГА, АВ и ЭВ, что является удобным инструментом для контроля эффективности противовирусной терапии.

Авторы:

Издание: Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии
Год издания: 2007
Объем: 6с.
Дополнительная информация: 2007.-N 5.-С.65-70. Библ. 12 назв.
Просмотров: 284