АНТИСМЫСЛОВАЯ РНК, ПОДАВЛЯЮЩАЯ РЕПРОДУКЦИЮ ВИРУСА ЛЕЙКОЗА КОРОВ В КЛЕТОЧНОЙ КУЛЬТУРЕ, ЭФФЕКТИВНО СВЯЗЫВАЕТСЯ С РНК-МИШЕНЬЮ IN VITRO

Аннотация:

Для выявления наиболее чувствительных мишеней в ретровирусном геноме к действию антисмысловых РНК. (асРНК) сконструированы две серии генов противовирусных асРНК, в одной из которых гены поставлены под контроль промотора VAI РНК аденовируса 5 типа человека, а в другой под контроль промотора Ш-области LTR вируса лейкоза коров (BLV). В качестве мишеней для действия асРНК были выбраны различные участки 5'-концевой области генома BLV. Сравнительный анализ противовирусного действия генов асРНК в клетках линии СС81 показал, что несмотря на эффективную экспрессию, гены асРНК, находящиеся под контролем промотора VAI РНК, обладали низкой антивирусной активностью. Напротив, гены асРНК под контролем промотора из-области LTR BLV эффективно ингибировали вирусную репродукцию, причем наибольшим противовирусным эффектом (около 98%) обладали асРНК, направленные на участок R-облаети вирусного генома, перекрывающий донорный сайт сплайсинга для всех субгеномных вирусных мРНК. Исследование кинетики взаимодействия различных молекул асРНК с РНК-мишенью in vitro и расчет констант скоростей их связывания показали, что k^ для молекул асРНК, обладающих высокой противовирусной активностью, и для молекул асРНК, не проявляющих противовирусного действия, но направленных на ту же мишень в вирусном геноме, отличаются на один порядок величины. Полученные данные свидетельствуют, что для подавления вирусной репродукции при помощи асРНК одним из основных факторов, по-видимому, является эффективность их взаимодействия с РНК-мишенью, выражаемая через константу скорости их связывания.

Авторы:

Издание: Молекулярная биология
Год издания: 1998
Объем: 9с.
Дополнительная информация: 1998.-N 2.-С.332-340
Просмотров: 16