ИЗМЕНЕНИЕ РЕГУЛЯЦИИ Lux-ОПЕРОНА, КЛОНИРОВАННОГО В РЕКОМБИНАНТНОЙ ПЛАЗМИДЕ В КЛЕТКАХ Escherichia coU, В РЯДУ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНЫХ ГЕНЕРАЦИЙ В РАЗНЫХ УСЛОВИЯХ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ

Аннотация:

При культивировании рекомбинантного штамма Е. coU Z905, содержащего плазмиду с генами бактериальной люминесценции и генами устойчивости к ампициллину, на плотных питательных средах наблюдается неоднородное свечение клеток в популяции. Данное явление не связано с потерей плазмиды в результате деления клеток или потерей /мл-оперона при репликации плазмиды. Поэтому мы предположили, что изменение экспрессии люминесценции в клетках Е. соИ Z905 обусловлено изменением регуляции /их-оперона. Известно, что люминесцентный оперон светящихся бактерий катаболит-зависим и подвержен, по крайней мере, двум типам регуляции, а именно, посредством САР-белка и белка-репрессора. При изменении некоторых параметров окружающей среды в клетках может измениться регуляция lux-оперона. Анализ вариантов Е. coU Z905, полученных при культивировании рекомбинантного штамма на твердых средах с высокой и низкой концентрацией легкодоступного органического вещества в течение 50 бактериальных генераций, показал, что на среде с высокой концентрацией органического вещества наряду с клетками, сохранившими исходный фенотип, уже через 2-3 генерации появляются варианты со слабым свечением, в динамике люминесценции которых отсутствует латентный период или свечение клеток не подвержено катаболитной репрессии глюкозой. Через 35 генераций варианты второго типа сменяются вариантами с более строгой регуляцией работы lux-генов, что выражено в сильном запаздывании индукции люминесценции. Таким образом, к 50-й генерации в популяции рекомбинантного штамма выделяются клетки с двумя типами регуляции. На среде с низкой концентрацией органических веществ варианты с ослабленным контролем работы lux-генов появляются уже в первой генерации и преобладают до 25-й генерации. В это же время в популяции появляются клетки с усиленной регуляцией, которые к концу эксперимента (через 50 генераций) доминируют в популяции Е. соИ Z905.

Авторы:

Издание: Молекулярная биология
Год издания: 1998
Объем: 2с.
Дополнительная информация: 1998.-N 2.-С.371-372
Просмотров: 39