Полный текст
УД К 616.36 - 002.12 : 578.891 : 577.125] - 085
О.В. Щепилова, Г.С. Томилка, О.А. Лебедько, Г.Г. Обухова, Г.П. Березина
Оценка ок сидантно-антиок сидантного статуса
у больных гепатитом А на фоне лечения даларгином
Дальневосточный государственный медицинский университет;
Институт охраны материнства и детства СО РАМН, г. Хабаровск
Резюме
Изучен оксидантно-антиоксидантный статус сыворот-
ки крови больных гепатитом А (ГА ) среднетяжелой формы.
Установлено, что при ГА развивается дефицит компонен-
тов антиоксидантной антирадикальной защиты. Установ-
лен выраженный корригирующий эффект даларгина в
отношении нарушений оксидантно-антиоксидантного ста-
туса у больных ВГА среднетяжелой формы.
O.V. Shchepilova, G.S. Tomilka, O.A. Lebedko,
G.G. Obukhova. G.P. Berezina
Estima tion of the oxidan t-an tio xidan t
status of pa tien ts with vi ral hepa titis A,
trea ted with Dalargin
FESMU, Khabarovsk
Summary
A study of the oxidant-antioxidant status of blood serum
of patients with semi-severe form of viral hepatitis A was conducted.
It was determined that viral hepatitis A causes deficit
of antioxidant antiradical defense components. A marked corrective
effect of Dalargin on the oxidant-antioxidant status of
blood serum of patients with semi-severe form of viral hepatitis
A was established.
Актуальность проблемы связана с широким распро-
странением вируса гепатита А (ГА ) и высоким уровнем
заболеваемости им во многих регионах Российской Фе-
дерации [9]. ГА сопровождается синдромом интокси-
кации и активацией процессов свободнорадикального
окисления [2, 5, 11].Наличие тяжелых форм заболевания,
летальность (0,5%) [11], случаи затяжной реконвалесцен-
ции и обострения ГА свидетельствуют о недостаточной
эффективности стандартной терапии.
Важную роль в регуляции функции желудочно-ки-
шечного тракта, в том числе гепатобилиарной системы,
играют эндогенные опиоидные пептиды. Доказано, что
при острых повреждениях печени агонисты опиоидных
d- и m-рецепторов, обильно представленных в тканевых
структурах печени, оказывают гепатопротекторный эф-
фект [13, 14].
Известно, что синтетический аналог эндогенного опи-
оидного пептида лей-энкефалина — даларгин (Tyr-D-Ala-
Gly-Phe-D-Leu-Arg), являющийся смешанным агонистом
d- и m-опиоидных рецепторов, обладает мощным анти-
оксидантным и антирадикальным действием, на основе
которого реализуются мембранно- и цитопротективный
эффекты этого препарата [6-8].
В доступной литературе мы не встретили сведений о
применении даларгина у больных с ГА .В связи с этим
целью исследования явилось изучение влияния далар-
гина на оксидантно-антиоксидантный статус сыворотки
крови больных ГА среднетяжелой формы.
Материалы и методы
В клинике инфекционных болезней Дальневосточно-
го государственного медицинского университета на базе
МУЗ «Городская клиническая больница №10» проведено
исследование, в которое были включены 35 пациентов ГА
среднетяжелой формы. 1 группа — 19 пациентов с ГА ,
получавших базисную терапию по общим принципам,
средний возраст 23,50±2,66 г., из которых 16 мужчин и 3
женщины; 2 группа — 16 больных, получавших даларгин
на фоне базисной терапии, средний возраст 24,93±2,54 г.,
среди которых 13 мужчин и 3 женщины.
Диагноз вирусного гепатита А установлен на основа-
нии обнаружения специфических маркеров (анти-HAV
IgM) в 100% случаев. Исследуемые группы были относи-
тельно однородными и сопоставимыми как по клиничес-
ким проявлениям, так и по биохимическим изменениям.
В качестве контроля изучены показатели у 30 практичес-
ки здоровых людей (доноров).
Базисная терапия заключалась в назначении диеты
№5 по Певзнеру и во внутривенном капельном введении
5% раствора глюкозы 800-1200 мл в сут.
Даларгин назначался ежедневно, внутривенно капель-
но в дозе 0,003 г 1 раз в день на 400 мл физиологического
раствора в течение 7 дн.
Забор крови у пациентов 1 и 2 групп для исследования
оксидантно-антиоксидантного статуса в рамках данной
работы осуществлялся трижды: на 2 день госпитализации
(период разгара), на 10 день госпитализации и на 21 день
госпитализации (период ранней реконвалесценции).
Для интегральной оценки процессов свободноради-
кального окисления (СРО) использовали метод хемилю-
минесценции (ХМЛ). Регистрацию ХМЛ осуществляли на
люминесцентном спектрометре LS-50B фирмы “PERKIN
ELMER” (Швейцария). Стандартизацию сигнала и мате-
матическую обработку кривых выполняли с помощью
встроенной программы «Finlab».
Спонтанную и индуцированную Fe2+ ХМЛ исследова-
ли по методу Ю.А. Владимирова [3]. Определяли свето-
сумму за 1 мин спонтанной ХМЛ (S1), величина которой
коррелирует с интенсивностью свободнорадикальных
процессов; максимум «быстрой» вспышки (h) индуци-
рованной ХМЛ, свидетельствующий о содержании гид-
роперекисей липидов, светосумму (S2) за 2 мин, после
«быстрой» вспышки, отражающую скорость образования
перекисных радикалов.
Кинетику ХМЛ, инициированную Н2О2 в присутс-
твии люминола [1], анализировали по параметрам: све-
тосумме люминол-зависимого свечения в течение 1 мин
(S3), величина которой пропорциональна содержанию
гидроксильных радикалов [3], максимуму свечения (Н),
указывающему на потенциальную способность биологи-
ческого объекта к перекисному окислению, и светосумме
за 2 мин ХМЛ (S4), величина которой свидетельствует об
активности антиоксидантной антирадикальной защиты
(АО РЗ). Интенсивность ХМЛ выражали в относительных
единицах.
Активацию процессов перекисного окисления липидов
на промежуточном этапе оценивали фотокалориметричес-
ки по содержанию малонового диальдегида (МДА ) мето-
дом В.Б. Гаврилова [4]. Неферментативное звено АО РЗ
оценивалось флюориметрически по уровню содержания
природного биоантиоксиданта a-токоферола по методу
L.D. Hansen в сыворотке крови [12]. Достоверность разли-
чия оценивали при помощи t-критерия Стьюдента.
Результаты и обсуждение
Результаты исследования свидетельствуют (таблица),
что в сыворотке крови у пациентов 1 и 2 групп при пос-
туплении в стационар (период разгара болезни) имело
место достоверное повышение уровня продуктов сво-
боднорадикального окисления относительно контроля.
И в 1, и во 2 группах показатель интенсивности свобод-
норадикальных процессов (S1) превышал аналогичный в
контроле в 2,02 и 2,05 раза соответственно. Возрастала
скорость образования перекисных радикалов липидной
природы (S2) в 2,34 и в 2,40 раза соответственно. В обеих
группах отмечено повышенное содержание гидроксиль-
ных радикалов (S3) в 1,81 и 1,84 раза соответственно. При
этом активизировались первичный и промежуточный
этапы перекисного окисления липидов: содержание гид-
роперекисей липидов (h) было повышено в 2,33 и в 2,30
раза и МДА — в 2,29 и 2,37 раза соответственно. Повы-
шение показателей оксидативного статуса сочеталось с
ослаблением антиоксидантной антирадикальной защиты
(АО РЗ) (S4) в 1,91 и 2,03 раза, в том числе со снижени-
ем резистентности организма к перекисному окислению
(Н) в 2,02 и 2,04 раза соответственно. При этом страдали
как неферментативное (снижение a-токоферола в 1,6 и
1,7 раза), так и ферментативное звенья АО РЗ. В пользу
последнего свидетельствовало угнетение активности ка-
талазы в виде увеличения (Н) (величина, обратная ката-
лазной активности, по данным М.П. Шерстнева) [10] в
2,02 и 2,04 раза соответственно.
Сравнительный анализ оксидантно-антиоксидантно-
го статуса сыворотки крови больных ВГА 1 и 2 групп
при поступлении в стационар достоверных различий не
выявил.
Показатели оксидантно-антиоксидантного статуса сыворотки крови больных среднетяжелой формой ГА
Показатель Контроль
При поступлении 10 день 21 день
1 группа 2 группа 1 группа 2 группа 1 группа 2 группа
S1 (отн.ед.) 0,61±0,02 1,23±0,07* 1,25±0,09* 1,14±0,11* 0,93±0,07*,** 0,97±0,06*,*** 0,70±0,07 ***
S2 (отн.ед.) 1,39±0,04 3,25±0,18* 3,32±0,17* 3,04±0,15* 2,50±0,16*,** 2,21±0,16*,*** 1,68±0,16 ***
S3 (отн.ед.) 0,73±0,02 1,32±0,10* 1,35±0,09* 1,15±0,16* 0,99±0,09*,** 1,02±0,09*,*** 0,75±0,06***
h (отн.ед.) 0,52±0,02 1,22±0,11* 1,21±0,11* 1,18±0,14* 0,88±0,09* 0,85±0,05*,*** 0,64±0,07 ***
Н (отн.ед.) 0,69±0,06 1,41±0,11* 1,42±0,13* 1,16±0,14* 1,04±0,11*,** 1,05±0,08*,*** 0,76±0,07***
S4 (отн.ед.) 1,42±0,03 2,72±0,16* 2,89±0,17* 2,36±0,22* 2,18±0,16*,** 2,13±0,18*,*** 1,65±0,12***
МДА (нмоль/мл) 17,56±0,87 40,24±2,02* 41,68±2,59* 35,98±1,12* 28,24±1,65*,** 24,95±1,32*,*** 19,79±0,67***
a-токоферол
(мкмоль/л) 22,64±1,14 12,82±0,95* 12,26±1,69* 13,23±0,78* 14,84±0,94* 14,86±0,79* 17,26±0,42*,***
Примечания. Достоверность различий между показателями средних значений при сравнении: * — с контролем достоверны (р<0,05); ** — с
исследованиями при поступлении и через 10 дн. (р<0,05); *** — с исследованиями при поступлении и через 21 дн. (р<0,05)
На фоне проводимой базисной терапии (1 группа) к
10 дн. не отмечено положительной динамики в отноше-
нии нарушений биогенеза активных кислородных мета-
болитов в сравнении с аналогичными при поступлении,
при этом сохранялось ослабление АО РЗ. Только к 21 дн.
госпитализации в этой группе больных выявлено досто-
верное, по сравнению с первым исследованием, снижение
показателей оксидантного статуса S1, S2, S3, h и МДА — в
1,27-; 1,47-; 1,29-; 1,44- и 1,61 раза соответственно. Выяв-
лено слабое усиление АО РЗ (S4) в 1,27 раза и повышение
резистентности организма к перекисному окислению (Н)
в 1,35 раза. Однако все эти показатели по-прежнему до-
стоверно отличались от контроля.
В то же время при проведении базисной терапии в
сочетании с даларгином, в сравнении с аналогичными
показателями при поступлении, уже на 10 день отмече-
но достоверное снижение величин S1, S2, S3, h и МДА
— в 1,35-, 1,33-, 1,37-, 1,37- и 1,47 раза соответственно.
Улучшились показатели антиоксидативного статуса в ви-
де повышения резистентности организма к перекисному
окислению (Н) в 1,33 раза и усиления АО РЗ (S4) в 1,32 ра-
за. При этом уровень a-токоферола повысился в 1,21 раза.
На 21 дн. госпитализации исследуемые показатели сы-
воротки крови пациентов 2 группы достигли контрольного
уровня и достоверно не отличались от такового, за исключе-
нием a-токоферола, уровень которого оставался сниженным
относительно контроля. Была установлена сильная отрица-
тельная связь между терапией с даларгином, с одной сторо-
ны, и показателями свободнорадикального окисления — с
другой: S1 (r= -0,98), S2 (r= -0,97), S3 (г= -0,98), h (r= -0,96).
Таким образом, положительная динамика исследуе-
мых ХМЛ-показателей сыворотки крови позволяет су-
дить об эффективности применения даларгина в качестве
корректора нарушений оксидантно-антиоксидантного
статуса у больных вирусным гепатитом А.
Выводы
1. У больных ВГА среднетяжелой формы в периоде
разгара болезни выявляется нарушение оксидантно-анти-
оксидантного статуса сыворотки крови.
2. Даларгин, корректируя нарушения оксидантно-ан-
тиоксидантного статуса, усиливает эффективность базис-
ной терапии и может быть предложен в качестве средства
патогенетической терапии.
Л и т е р а т у р а
1. Арутюнян А.В. Методы оценки свободнорадикаль-
ного окисления и антиоксидантной системы организма:
Мет. рек. СПб.: Наука, 2000. С. 198.
2. Буеверов А.О. // Рос. журн. гастроэнтерол., гепа-
тол., колопроктол. 2002. №4. С. 21-24.
3. Владимиров Ю.А. // ВИНИ ТИ АН СССР: Ито-
ги науки и техники. Сер. Биофизика. М., 1991. Т. 29.
147 с.
4. Гаврилов В.Б., Гаврилова А.Р., Мажуль Л.М. // Воп-
росы мед. химии. 1987. №1. С. 118-121.
5. Дудник Л.Б., Виксна Л.М., Майоре А.Я. // Вопросы
мед. химии. 2000. №6. С. 597-609.
6. Львова С.П., Абаева Е.М., Гасангаджиева А.Г. и др.
// Вопросы мед. химии. 2002. Т. 48. С. 189-195.
7. Лишманов Ю.Б., Травков Ю.А., Федотов Т.В. и др.
// Бюл. эксперимент. биологии и медицины. 1991. №6. С.
619-621.
8. Миху И.Я., Изачик Ю.А., Ружицкая Е.А. // Клин.
лаб. диагностика. 1994. №1. С. 9-10.
9. Онищенко Г.Г. // Эпидемиология и инфекционные
болезни. 2002. №6. С. 4-13.
10. Шерстнев М.П. Разработка хемилюминесцентных
методик исследования плазмы и клеток крови для оценки
состояния больных: Автореф. дис. … д-ра мед. наук. М.,
1997. 43 с.
11. Ющук Н.Д., Венгеров Ю.Я. Лекции по инфекци-
онным болезням. Т. 2. М.:ВУНМЦ, 1999. 431 с.
12. Hansen L.D., Warioric W.T. // Amer. J. Clin. Pathol.
1966. Vol. 46, P. 117.
13. Wittert G., Hope P., Pyle D. // Biochem. Biophys. Re
Commun. 1996. Vol. 218, №3. P. 877-881.
14. Yamanouchi K., Yanaga K., Okudaira S. et. Al. // J.
Sur. Res. 2003. Vol. 114, №1. P. 72-77.
Изучен оксидантно-антиоксидантный статус сыворотки крови больных гепатитом А (ГА) среднетяжелой формы. Установлено, что при ГА развивается дефицит компонентов антиоксидантной антирадикальной защиты. Установлен выраженный корригирующий эффект даларгина в отношении нарушений оксидантно-антиоксидантного статуса у больных ВГА среднетяжелой формы.
Добавить в коллекцию