ЭКСПРЕССИЯ В ESCHERICHIA COLI ГЕНОВ celA И xylA, ИЗОЛИРОВАННЫХ ИЗ ФРАГМЕНТА МЕТАГЕНОМНОЙ ДНК

Аннотация:

Гены гликозилгидролаз се15А и ху13А, изолированные нами ранее в составе фрагмента ДНК из метагеномной библиотеки микрофлоры рубца желудка коровы, были субклонированы и экспрессированы в Е.coli. Рекомбинантные белки Се15А и Ху13А очищены и охарактеризованы. Целлюлаза Се15А относится к семейству 5 гликозилгидролаз и представляет собой одномодульный фермент с молекулярной массой 38,2 кД. Фермент гидролизует 1,4-бета-гликозидные связи ряда растворимых бета-глюканов и аморфной целлюлозы, проявляя максимальную активность (31 200 ед на 1 мг белка) на лихенане, растворимом субстрате со смешанными (бета-1,3-1,4) связями. Конечным продуктом гидролиза аморфной целлюлозы является целлобиоза. Се15А не гидролизует кристаллические формы целлюлозы. Фермент представляет собой эндоглюканазу со способностью к экзофункции. Бета-ксилозидаза Ху13А относится к семейству 3 гликозилгидролаз. Молекулярная масса рекомбинантного фермента 83,7 кД. Он активен только на ксилоолигосахаридах с максимальной активностью на ксилобиозе, конечным продуктом реакции является ксилоза. Ху13А не гидролизует ксилан. Рекомбинантные Се15А и Ху13А стабильны в широком диапазоне рН и температур, максимальную активность проявляют при рН 6,5 и температуре 55°С.

Авторы:

Издание: Молекулярная генетика ,микробиология и вирусология
Год издания: 2009
Объем: 5с.
Дополнительная информация: 2009.-N 2.-С.28-32. Библ. 22 назв.
Просмотров: 32