ОБРАЗОВАНИЕ ЛАКТОЗОРЕЗИСТЕНТНЫХ АГРЕГАТОВ ТРОМБОЦИТОВ ПОД ДЕЙСТВИЕМ ЛЕКТИНА ОМЕЛЫ И РАЗЛИЧНЫЕ СИГНАЛЬНЫЕ ОТВЕТЫ КЛЕТОК НА ЛЕКТИН И ТРОМБИН

Аннотация:

Тромбоциты человека являются удобной и физиологически значимой моделью для изучения рецепторзависимой агрегации клеток и сопряженных сигнальных реакций. Поскольку гликоконъюгаты клеточной поверхности выступают в качестве лигандов в процессах белок-углеводного узнавания, то представляет интерес изучение взаимодействия этих эпитопов с растительными пектинами и лектин-индуцированных внутриклеточных ответов. Для этих целей был использован галактозидспецифичный лектин омелы белой (Viscum album L. agglutinin, VAA). Установлено, что VAA в концентрации 2,5 мкг/мл индуцирует эффективную агрегацию тромбоцитов, сопровождающуюся образованием лактозочувствительных (Lac*) и лактозорезистентных (Lac ) межклеточных контактов. Lac-Агрегаты образовывались только метаболически активными тромбоцитами и были характерны для 70% изученных доноров. Необходимость метаболической активности клеток для образования таких контактов подтверждалась данными об отсутствии их образования при действии таких метаболических ингибиторов, как нордигидрогваяретовая кислота, М-этилмалеимид и менадион. Эффективная агрегация клеток под действием VAA не сопровождалась изменением базального уровня ионов Са^ в клетках и приводила к снижению скорости менадионзависимой генерации Н^Од. В параллельной серии экспериментов агрегация тромбоцитов под действием тромбина (0,03 ед/мл) сопровождалась увеличением уровня ионов Са в цитоплазме и усилением генерации НдО. В целом полученные результаты свидетельствуют о том, что метаболические реакции, индуцированные лектином, способствуют стабилизации клеточных агрегатов, причем агрегация тромбоцитов человека под действием VAA и тромбина сопровождается различными ответами клеток, включающими изменение внутриклеточного уровня ионов Са и генерацию НОд. Галактозидспецифичный лектин омелы белой (Viscum album L. agglutinin, VAA) образует агрегаты определенной стехиометрии с N-связанными гликанами, что является предпосылкой кластеризации лигандов клеточной поверхности и стимулирует процессы трансмембранной сигнализации в иммунокомпетентных клетках [1-3]. Клеточные ответы, которые опосредованы галактозидспецифичными взаимодействиями, включают такие реакции, как изменение фосфорилирования различных белков и фосфолипидов [1], увеличение концентрации ионов Са * в цитоплазме макрофаго-/моноцитоподобных клеток человека и мышей [1, 4], а также тимоцитов крыс [5], генерация супероксида и H^O; нейтрофилами человека [6, 7], усиление менадионзависимой генерации Н^О^ тимоцитами крыс [5], дегрануляция нейтрофилов человека [8], секреция цитокинов мононуклеарными клетками крови человека [9, 10]. Реакции высвобождения из клеток интермедиатов окислительного метаболизма происходят в течение первых минут после связывания лектина с мембранными рецепторами и одновременно с процессом клеточной агрегации. Обеспечение этого процесса является специфическим свойством пектинов, которое

Авторы:

Издание: Биохимия
Год издания: 1998
Объем: 9с.
Дополнительная информация: 1998.-N 5.-С.611-619
Просмотров: 53