МЕТОДИКА ИЗУЧЕНИЯ ФОТОРЕАКТИВНОСТИ ИЗОЛИРОВАННОГО СЕРДЦА КРЫСЫ

Аннотация:

Изложена методика приготовления препарата изолированного сердца крысы. Детально описана аппаратура для регистрации сократительной активности спонтанно сокращающихся сердец, позволяющая синхронизировать облучение сердца светом низкоинтенсивного лазера с фазами сердечного цикла. Хронобиологические аспекты фоточувствительности живых тканей представляют интерес в исследовании влияния низкоинтенсивного лазерного излучения на автоколебательную систему изолированного сердца. Приготовление препарата по методу Лангендорффа требует определенных навыков и адекватного технического обеспечения. В данной работе описана модификация методики изоляции сердца, а также способ регистрации его деятельности и управления режимами фотовоздействия. Схема экспериментальной установки представлена на рис. 1. Для приготовления препарата изолированного сердца у наркотизированной эфиром крысы массой 180-200 г вскрывается грудная клетка, быстро вырезается сердце и переносится в чашку Петри с ледяным раствором Кребса-Хензелейта. Сокращения сердца прекращаются через несколько секунд. Не извлекая из раствора, препарат освобождают от окружающих тканей. Легким массажем из полостей удаляют кровь, затем отпрепаровывают дугу аорты. Для перфузии сердца целесообразно использовать двойную аортальную канюлю (рис. 1, 7), штативная часть которой имеет 2 шлифа (для термометра и собственно канюли) и 2 отвода - для введения и сброса перфузирующего раствора. Второй отвод облегчает поддержание заданной температуры раствора, не допуская перегрева или охлаждения. Эта часть закрепляется в штативе. Съемная часть канюли вводится в аорту таким образом, чтобы ее кончик находился над клапаном, и закрепляется при помощи серфина с изогнутыми овальными губками. Канюля с сердцем извлекается из чашки Петри, быстро закрепляется в штативной части и помещается внутрь стеклянной двухстенной камеры с отверстиями для прохождения нити датчика и луча лазера (рис. 1, 2), после чего начинается перфузия оксигенированным раствором Кребса-Хензелейта следующего состава (в ммоль/л): NaCI - 118, KCI - 4.7, CaCI, - 2.5, MgSO, - 1.2, NaHCO3-25, КН2РО4- 1.2, Na2-EDTA - 0.5, глюкоза 5.5 (pH 7.4) при 37°С и давлении 60 см вод. ст. Постоянное давление в аорте обеспечивается при помощи сосуда Мариотта (рис. 1). Раствор из сосуда Мариотта поступает в бюретку по стеклянной трубке, кончик у которой загнут во избежание попадания пузырьков газа, где и оксигенируется под низким давлением. Через 30-60 с изолированное сердце начинает спонтанно сокращаться. В таких условиях сердце может работать 2-3 ч. К верхушке сердца с помощью лигатуры подсоединяется шторка датчика. Нагрузка на сердце составляет 5-10 г и прилагается к шторке фотодатчика. До начала экспериментов для стабилизации параметров сокращения сердце работает 15-20 мин.

Авторы:

Издание: Бюллетень экспериментальной биологии и медицины
Год издания: 1998
Объем: 4с.
Дополнительная информация: 1998.-N 6.-С.717-720. Библ. 3 назв.
Просмотров: 26