ОПРЕДЕЛЕНИЕ АНТИГЕНА CANDIDA ALBICANS С ПОМОЩЬЮ АМПЕРОМЕТРИЧЕСКОГО ИММУНОФЕРМЕНТНОГО СЕНСОРА.

Аннотация:

Цель настоящей работы - разработка новою варианта иммунофрментного анализа с помощью амперометрического иммуноферментного сенсора, включающего в биочувствительную часть фермент-холинэстеразу и антитела против Candida albicans в иммобилизованном виде, для диагностики заболеваний, вызванных Candida albicans (СА) грибами. Разработанный способ определения основан на сочетании иммунохимических реакций с вольтамперометрической индикацией аналитического сигнала. В качестве детеетирующего устройства использовали разработанный амперометрический иммуноферментный сенсор. Для определения использовали антитела гфотив антигена СА в различных разведениях, иммобилгоованные совместно с холинэстеразой. Разработанный способ иммобилизации позволяет поучить биочувствительную часть сенсора, то есть пленку ш нитроцеллюлозы с включенными в нее антителами и холинэстеразой, прочно удерживаемыми матрицей. В основе метода лежит сочетание реакции образования иммунного комплекса антитело-антиген с использованием иммуноферментиого сенсора для его индикации. Динамический диапазон определяемых концентраций антигена зависит от степени разведения антител, используемых для получения биочувствительной части сенсора. Определены константы Скетчарда, значения которых позволяют судить о прочности образующегося имунного комплекса. Данный способ определения нс требует специальной подготовки образца, отличается селективностью, чувствительностью, простотой и экспрессностью, что дает возможность создать тест^систему для от^еделения СА в крови. ВВЕДЕНИЕ. Одним из основных вопросов иммунохимии является изучение взаимодействия антител (Ат) с антигенами (Аг). Большинство иммунохимических тестов, в том числе и иммуноферментных, базируется на спектрофотометрических методах [1] или на методах, основанных на введении радиоактивной или флуоресцентной метки в один из компонентов биоспецифического взаимодействия. Различные варианты ИФА достаточно часто используются для диагностики заболеваний человека, животных и растений [2]. Однако эти методы зачастую довольно трудоемки, требуют специальных приемов исполнения и квалифицированного персонала [1-3]. Весьма перспективен метод иммуноферментного анализа (ИФА) с использованием иммуноферментных биосенсоров [4,5].

Авторы:

Издание: Вопросы медицинской химии
Год издания: 1998
Объем: 7с.
Дополнительная информация: 1998.-N 2.-С.172-178
Просмотров: 53