ПОГЛОЩЕНИЕ ДНК БАКТЕРИАЛЬНОЙ КЛЕТКОЙ: ЕСТЕСТВЕННЫЙ ПРОЦЕСС И ЛАБОРАТОРНЫЕ ПРИЕМЫ

Аннотация:

В 1998 г. исполняется 70 лет со времени выхода статьи Ф. Гриффитса, в которой впервые было описано явление трансформации у бактерий [1]. Вряд ли автор статьи, опубликованной в медицинском журнале гигиенического направления, тогда предполагал, что описанный им на пневмококках феномен положит начало огромному количеству работ, имеющих как фундаментальное, так и прикладное значение. Достаточно упомянуть, что явление генетической трансформации, после выхода работы О. Звери и др. [2] в 1944 г., послужило в начале 50-х годов одним из решающих доказательств роли ДНК как хранителя наследственной информации; во многом благодаря трансформации посредством плазмидной ДНК в 70-х годах появилось такое направление, как генетическая инженерия. Весь процесс генетической трансформации может быть подразделен на адсорбцию и поглощение ДНК бактериальной клеткой и дальнейшую судьбу этой ДНК в клетке, включая рекомбинацию с хромосомой и пострекомбинационные стадии. Исторически сложилось так, что при изучении механизмов трансформации вначале большее внимание уделялось именно рекомбинационным событиям; механизмы адсорбции и поглощения относили скорее к области физиологии, а не генетики клетки. Эти механизмы, особенно на такой модели, как Bacillus subtilis, стали планомерно и всесторонне изучаться лишь последние 10-15 лет. При этом были вскрыты столь сложные и многоэтапные процессы, контролируемые множеством генов и непосредственно связанные с рекомбинационными событиями, что они заслуживают отдельного рассмотрения. Поэтому предметом настоящего обзора являются преимущественно работы, относящиеся к начальным этапам генетической трансформации у бактерий. Кроме того, представляет интерес бегло рассмотреть в этом контексте чисто лабораторные методы введения ДНК в бактериальную клетку, хотя и "противоестественным" путем. Как всегда, вначале надо условиться о терминологии. Способность бактериальных клеток поглощать ДНК называется компетентностью; большей частью это - преходящее состояние. Поглощению предшествует необратимая адсорбция (адсорбированную на поверхности компетентных клеток ДНК невозможно удалить промыванием, в отличие от некомпетентных клеток). ДНК считается поглощенной, когда ее уже нельзя разрушить посредством обработки клеток нуклеазами; именно этот момент принято считать "точкой отсчета" для следующих, "рекомбинационных" этапов трансформации.

Авторы:

Издание: Генетика
Год издания: 1998
Объем: 12с.
Дополнительная информация: 1998.-N 5.-С.581-592
Просмотров: 121