ГЕНЕТИЧЕСКИЙ КОНТРОЛЬ БИОСИНТЕЗА ПУРИНОВ У ДРОЖЖЕЙ Pichia methanolica ИДЕНТИФИКАЦИЯ БИФУНКЦИОНАЛЬНОГО ГЕНА ADE7,4, КОНТРОЛИРУЮЩЕГО АКТИВНОСТИ GAR-СИНТЕТАЗЫ И AIR-СИНТЕТА

Аннотация:

Исследована коллекция индуцированных и спонтанных мутантов ade4, ade7 и ade4 ade7 дрожжей Pi chia methanolica. С помощью биохимических и генетических методов показано, что локус АОЕ7,4 является сложным структурным геном, контролирующим 2-й (Е2) и 5-й (Е5) этапы биосинтеза пуриновых нуклеотидов (БПН) de novo. Установлено, что домен ADE4 детерминирует фосфорибозиламиноимидазол-синтетазу, или AIRS (Е5), а домен ADE7- фосфорибозилглицинамид-синтетазу, или GARS (Е2). Генетические свойства этого локуса, такие, как контроль двух ферментативных активностей, наличие двух доменов, а также способность к межаллельной комплементации (МАК) у мутантов по домену ADE4, детерминирующему AIR-синтетазную активность, - идентичны свойствам гомологичных генов (ADE5/7 и adel) у таксономически далеких видов Saccharomyces cerevisiae и Schizosaccharomyces pomhe. Проведенная идентификация послужила основой для клонирования последовательности ADE7, 4рт из библиотеки генов P. methanolica, сконструированной на векторе YEpl3. Клонирование осуществлено в реципиенте S. cerevisiae по комплементации мутации аde7. Соответствие клонированного гена подтверждено трансформацией мутантов ade4, ade7 и аde7,4 дрожжей P. methanolica.

Авторы:

Издание: Генетика
Год издания: 1998
Объем: 9с.
Дополнительная информация: 1998.-N 1.-С.52-60
Просмотров: 50