Разработка тест-системы для количественной детекции ДНК бактерий Escherichia coli, Streptococcus agalactiae, а также представителей рода Klebsiella методом ПЦР-РВ в экспресс-диагностике перинатальных инфекций

Аннотация:

В работе описано создание диагностической тест-системы, основанной на принципе мультипраймерной полимеразной цепной реакции в режиме реального времени и предназначенной для одновременной детекции Escherichia coli, Streptococcus agalactiae и бактерий рода Klebsiella в различных типах клинического материала. В ходе проведенного исследования был осуществлен дизайн последовательностей праймеров и олигонуклеотидных зондов Taqman, а также подбор оптимальных условий проведения реакций амплификации. Был создан набор рекомбинантных плазмид для использования в качестве калибраторных ДНК и ДНК внутреннего контроля. Помимо этого был предложен оптимальный вариант методики выделения ДНК из клинического материала. Апробация разработанной тест-системы проводилась с использованием симулированных клинических образцов, а также клинических образцов, полученных от недоношенных новорожденных. Разработанная тест-система продемонстрировала высокую диагностическую чувствительность и специфичность и после проведения дополнительных испытаний может быть внедрена в клиническую практику.

Авторы:

Издание: Инфекционные болезни
Год издания: 2010
Объем: 5с.
Дополнительная информация: 2010.-N 2.-С.42-46. Библ. 11 назв.
Просмотров: 24