ВЫСОКОАФФИННЫЙ ЗАХВАТ ХОЛИНА СИНАПТОСОМАМИ СТРИАТУМА В ШИРОКОМ ДИАПАЗОНЕ рН

Аннотация:

В диапазоне рН 5-9 исследована интенсивность процессов, составляющих высокоаффинный захват холина (ВЗХ): Na+-зависимого и независимого от Na^ транспорта. Эксперименты проведены на фракции, обогащенной синаптосомами, полученной из стриатума белых крыс. Кривые рН-зависимостей скорости реакции при различных концентрациях холина (1, 2, 4, 5 мкМ) демонстрируют 3 области: 1) при рН > 7 мы наблюдали превышение Na^-зависимого транспорта над Na^-независимым; 2) рН 6-7 является областью инверсии или перекрестка кривых двух процессов; 3) при рН < б наблюдалось явное превышение интенсивности Na^-независимого процесса над Na^-зависимым. Рассчитаны кинетические параметры процессов (К," и V^ax)- Предполагается, что вторая область рН может иметь регуляторное значение в деятельности холинергического синапса. Перенос холина через нейрональную мембрану для последующего синтеза ацетилхолина (АХ) - высокоаффинный, натрийзависимый процесс (ВЗХ) [1]. ВЗХ осуществляется посредством переносчика, локализованного в нейрональной мембране, который имеет высокое сродство к холину (0,4-4 мкМ) и специфически связан с биосинтезом функционально важного нейромедиатора АХ [1, 2]. Переносчик, очевидно, представляет собой полипептид с молекулярной массой 80 кДа [3] и является одним из двух пресинаптических холинергических маркеров (второй - холинацетилтрансфераза, фермент, синтезирующий АХ, К.Ф. 2.3.1.6) [2]. В гомогенатах стриатума крысы кроме переносчика с высоким сродством (Кщ = = 1,4 мкМ) обнаружен переносчик с низким сродством (К^ = 93 мкМ) [4]. Они отличаются друг от друга месторасположением и функциональным значением. Если первый локализован в нервных терминалях и связан с синтезом АХ, то второй имеется в поверхностной мембране большинства клеток и, возможно, способствует процессу облегченной диффузии холина[5]. В теоретической работе Kuhar and Murrin подробно рассмотрены некоторые аспекты процесса ВЗХ - его ионную, энергетическую зависимости, функциональную связь с синтезом АХ [6]. Достаточно полно описана ионная зависимость ВЗХ, включая процесс К^-деполяризации [7,8]. В нейронах и синаптосомах как в их модели одновременно с ВЗХ и как бы параллельно ему, с интенсивностью в несколько раз меньшей, идет также высокоаффинный, но независимый от Na+ процесс захвата холина. Независимый от Na^ захват ранее рассматривали либо как самостоятельный процесс [6,9, 10], либо как неспецифическое связывание холина с мембраной (что обязательно учитывалось контрольной пробой при измерении интенсивности ВЗХ) [II, 12]. В настоящее время показано, что ингибиторы ВЗХ - четвертичные и третичные производные хинуклидина по-разному ингибируют Na^-зависимый и Na^-независимый захват ([1]5о 0,9 и 680 мкМ соответственно) [1]. Этот факт кажется свидетельством в пользу относительной обособленности двух процессов. Возможно, независимый от Na+ захват может иметь самостоятельное значение в последовательности событий, происходящих в синапсе при нервном проведении. Важным условием функционирования синапса является кислотно-щелочной гомеостаз, определяемый соотношением ионов, многие из которых (Na^, Са^, С1~) обязательные участники синаптического проведения. Показано, что величина рН является биологическим регулятором: обнаружено возрастание активности ферментов после рН-сдвига [13], изменение тока ионов Са^ через мембрану [14] и скорости многих мембраносвязанных реакций [15, 16]. Цель настоящей работы - исследовать взаимоотношения двух связанных процессов ВЗХ в широком диапазоне рН.

Авторы:

Издание: Нейрохимия
Год издания: 1998
Объем: 6с.
Дополнительная информация: 1998.-N 3.-С.312-317
Просмотров: 86