ФАКТОРЫ СПЛАЙСИНГА В ЯДРАХ ООЦИТОВ ИЗ АНТРАЛЬНЫХ ФОЛЛИКУЛОВ ЧЕЛОВЕКА
Прежние ультраструктурные и авторадиографические исследования (Парфенов и др., 1984; Parfenov et al., 1989) показали, что в зависимости от расположения внутриидерньи структур и интенсивности включения Н^-уридина ооциты из антральных фолликулов чедовека распадаются на три группы, которые составляют последовательный ряд стадий - активную, промежуточную и неактивную. Последняя характеризуется сильной компактизацией ядерных структур и концентрацией их в одном ограниченном участке ядра. В настоящей работе методами иммуноалектронной микроскопии в ядрах ооцитов этих трех групп мы демонстрируем распределение факторов сплайсинга (мяРНП и SC35) и рВО-коилина. По мере затухания синтетической активности ядер наблюдается уменьшение количества мяРНП и SC35 в кариоплазме. Одновременно эти факторы сплайсинга аккумулируются в кластерах интерхроматиновых гранул (КИГ). В КИГ мяРНП и SC35 пространственно сегрегированы: мяРНП связаны с фибриллярными зонами, а SC35 - с гранулярным компонентом КИГ. КИГединственные структуры ядер ооцитов из антральных фолликулов человека, содержащие факторы сплайсинга, В этих ядрах отсутствуют типичные - скрученные тельца (СТ). Основной маркерный белок СТ - р80-коилин в значительном количестве обнаружен в ядрышкоподобном теле (ЯПТ) ооцитов человека. Вопреки данным, полученным на ооцитах из антральных фолликулов других млекопитающих (Кореспу et а]., 199ба, 1996Ь), ЯПТ ооцитов человека не содержит мяРНП и SC35. Полученные данные дают основания предполагать следующее: 1) факторы сплайсинга, мобилизованные к местам транскрипции в кариоплазме ооцитов человека, при инактивации концентрируются в КИГ; 2) КИГ в преовуляторных ооцитах человека играют существенную роль в накоплении и хранении факторов сплайсинга. К началу 90-х годов было создано новое направление, в котором изучаются внутриядерные домены, вовлеченные в созревание РНК (см. обзор: Spector, 1993). Был выявлен ряд ядерных структур в клетках млекопитающих, содержащих компоненты сплайсинга пре-мРНК. Среди них отмечаются перихроматиновые фибриллы (ПФ), - скрученные тельца (СТ) и кластеры интерхроматиновых гранул (КИГ). ПФ выявляются на периферии конденсированного хроматина (Fakan, 1994). В связи с тем что в их составе были обнаружены коровые белки гетерогенной ядерной РНК (Fakan et al., 1984) и малые ядерные РНП (Plivion et al., 1984), ПФ рассматривают как своеобразное морфологическое выражение гетерогенной ядерной РНК, с которой связаны активные компоненты сплайсинга (Fakan et al., 1994). Другими структурами, несущими компоненты сплайсинга, являются СТ (Lamond, Carmo-Fonseca, 1993). СТ содержат маркерный белок рЗО-коилин (Andrade et al., 1991), малые ядерные РНП (Raska et al., 1991) и ряд малых ядерных РНК (Raska et al., 1991; Visa et al., 1993a, 1993b). Значение этих структур в метаболизме РНК остается невыясненным. Интенсивному изучению подвергались кластеры интерхроматиновых гранул (КИГ). Оказалось, что выявляемые на ультраструктурном уровне КИГ соответствуют обнаруженным при иммунофлуоресцентном анализе - ядерным доменам, содержащим компоненты сплайсинга (Spector et а., 1991, 1993; Visa et al" 1993a, 1993b).
Девис Д.С.Костючек Д.Ф.Мурти К.Г.Парфенов В.Н.Почукалина Г.Н.
Цитология
1998
9с.
1998.-N 4.-С.239-247
26
Посетитель (IP-адрес: 18.217.55.29)