РОЛЬ ПРОТЕИНКИНАЗЫ С В РЕГУЛЯЦИИ Са-ОТВЕТОВ, ИНДУЦИРОВАННЫХ ПУРИНЕРГИЧЕСКИМИ АГОНИСТАМИ И ТАПСИГАРГИНОМ В ПЕРИТОНЕАЛЬНЫХ МАКРОФАГАХ КРЫСЫ

Аннотация:

С использованием флуоресцентного Са^-зонда Fura-2 исследовано влияние активатора протеинкиназы С форбол-12-миристат-13-ацетата (РМА) на Са^-сигналы, вызванные пуринергическими агонистами (АТФ и УТФ) и тапсигаргином в перитонеальных макрофагах крысы. Показано, что 100 нг/мл РМА практически полностью подавляет вход Сг?* в макрофаги, индуцированный 200 мкМ АТФ или 200 мкМ УТФ. Активация протеинкиназы С форболовым эфиром приводит также к блокированию депозависимого или <емкостного> входа Са^. вызванного опустошением Са-депо при действии ингибитора эндоплазматических Са^^-АТФаз тапсигаргина (0.5 мкМ). Ингибитор протеинкиназы С (соединение Н-7) практически полностью предотвращает ингибирующее действие РМА. Полученные данные свидетельствуют о важной роли протеинкиназы С в регуляции входа Са^ в перитонеальные макрофаги крысы. Фагоцитирующие клетки отвечают на воздействие разнообразных агонистов, быстро гидролизуя мембранные фосфолипиды, что приводит к генерации большого числа внутри- и внеклеточных мессенджеров. Так, связывание АТФ и УТФ с пуринорецепторами типа Рц) в мембране перитонеальных макрофагов приводит к активации фосфоинозитидного цикла, гидролизу фосфатидилинозитол-4,5-дифосфата и образованию двух вторичных посредников - инозитол-1,4,5-трифосфата и диацилглицерола (Alonso-Torre, Trautmann, 1993). Инозитол-1,4,5-трифосфат открывает инозитол-1,4,5-трифосфат-чувствительные Са^-каналы в мембране эндоплазматического ретикулума и вызывает мобилизацию Са^ из депо (Berridge, 1993). Диацилглицерол активирует один из ключевых ферментов в клетке протеинкиназу С (Nishizuka, 1984, 1995). Протеинкиназа С активно участвует во многих внутриклеточных процессах, в первую очередь в процессах Са^-сигнализации. Так, обнаружено, что активация протеинкиназы С приводит к ингибированию продукции инозитол-1,4,5-трифосфата (Bird et а1., 1993) и тем самым к ингибированию мобилизации Са^ из депо. В некоторых типах клеток активация протеинкиназы С вызывает блокирование депозависимого входа Са^ (Montero et а1., 1993; Tornquist, 1993; Petersen, Berridge, 1994; Parekh, Penner, 1995). Для выявления участия протеинкиназы С в различных клеточных процессах используют активатор протеинкиназы С 4-форбол-12-миристат-13-ацетат (РМА). Последний, как и другие форболовые эфиры, легко проникает в клетку и, имея структурное сходство с диацилглицеролом, взаимодействует с его участком связывания на молекуле протеинкиназы С (Nishizuka, 1984, 1988). В связи с этим форболовые эфиры широко используются как прямые активаторы протеинкиназы С. В настоящей работе для выявления возможной роли протеинкиназы С в процессах Са^-сигнализации мы исследовали влияние форболового эфира РМА на Са^-ответы, индуцированные пуринергическими агонистами (АТФ, УТФ) и тапсигаргином, в перитонеальных макрофагах крысы.

Авторы:

Издание: Цитология
Год издания: 1998
Объем: 13с.
Дополнительная информация: 1998.-N 5.-С.445-457
Просмотров: 73