ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ФОТОПРИШИВАЕМЫХ ДНК-ЗОНДОВ ДЛЯ ФЛУОРЕСЦЕНТНОЙ ГИБРИДИЗАЦИИ IN SITU

Аннотация:

Исследована возможность использования фотопришиваемых ДНК-зондов для проведения флуоресцентной гибридизации in situ. ДНК-зонды модифицировали путем введения в них фотонуклеотидов -оснований, содержащих фотоактивную группу (тетрафторбензазид) и способных при облучении в области 300-330 нм образовывать ковалентную связь с матричной ДНК. Фотонуклеотид включали в зонд либо с помощью реакции ник-трансляции, либо при элонгации гибридизованного зонда фрагментом Кленова. Показано, что ДНК-зонд, ковалентно пришитый к хромосоме, способен удерживаться на месте гибридизации в условиях последующей денатурирующей отмывки, что позволяет проводить последовательные гибридизации с выборочным сохранением сигналов от предыдущей гибридизации. Это способность фотонуклеотида была использована для проведения двухступенчатой гибридизации. Для демонстрации этого свойства были проведены эксперименты на модельных системах

Авторы:

Издание: Цитология
Год издания: 1998
Объем: 5с.
Дополнительная информация: 1998.-N 8.-С.763-767
Просмотров: 20