НОВЫЕ ИЗОШИЗОМЕРЫ РЕСТРИКЦИОННЫХ ЭНДОНУКЛЕАЗ В ШТАММАХ PSEUDOMONAS AERUGINOSA

Аннотация:

С целью поиска новых сайтспецифических эндонуклеаз проведен анализ коллекции клинических штаммов Pseudomonas aeruginosa Киевского НИИ эпидемиологии и инфекционных болезней им. J1. В. Громашевского. Обнаружено 5 штаммов, содержащих эндонуклеазы рестрикции, узнающие 3 различные последовательности нуклеотидов. Для выделенных эндонуклеаз рестрикции определены узнаваемые последовательности нуклеотидов и показано место расщепления субстрата. Установлено, что эндонуклеазы рестрикции Pae2kl и Pael8kl узнают и расщепляют нуклеотиднук) последовательность ДНК так же. как и Bglll (5'-A/GACTC-3'), эндонуклеазы Pae5kl и Pael4kl - так же, как Sacll (5'-CCGC/GG-3'), а эндонуклеаза Pael7kl является истинным изошизомером рестриктазы Pvlill (5'-CAG/CTG-3'). Специфичности Bglll и Pviill обнаружены впервые в штаммах Pseudornonas aeruginosa. Эндонуклеазы рестрикции II класса являются наиболее распространенным и наиболее изученным в настоящее время классом среди всех нуклеаз. Благодаря своей способности узнавать строго определенные последовательности нуклеотидов эндонуклеазы нашли широкое применение в молекулярно-генетических и биотехнологических работах. Несмотря на то что к настоящему времени открыто более 2400 ферментов, представленных 188 специфичностями [9], их поиск продолжается. Это обусловлено тем, что обнаружение ферментов с новой специфичностью расширяет возможности исследователей по конструированию рекомбинантных ДНК, секвенированию и исследованию полиморфных участков генома эукариотических организмов. Поиск штаммов-продуцентов и определение специфичностей связаны также с тем, что о самих системах, их распространении, локализации генов и путях эволюции известно крайне мало. Целью настоящей работы явились поиск, очистка, идентификация и определение локализации генов, кодирующих эндонуклеазы рестрикции в штаммах Pseudornonas aeruginosa - вида, в котором найдено всего лишь 8 эндонуклеаз с различными специфичностями [9].

Авторы:

Издание: Молекулярная генетика ,микробиология и вирусология
Год издания: 1998
Объем: 4с.
Дополнительная информация: 1998.-N 2.-С.14-17
Просмотров: 40