Симметрия и размеры ядер двуядерных лимфоцитов как показатели генотоксичесной активности веществ: тестовое исследование N-метил-N-нитро-N-нитрозогуанидина

Аннотация:

В статье описан авторский метод морфометрии ядер лимфоцитов крови человека, подготовленных для анализа в микроядерном тесте. Исследование включает оценку генотоксической активности 5.1-40.8 мкмоль/ мл стандартного мутагена N-метил-N-нитрo-N-нитрозогуанидина в микроядерном тесте на культуре крови человека, и параллельное определение ряда морфометрических показателей ядер двуядерных лимфоцитов. Показано, что цитогенетические показатели нестабильности генома коррелируют с изменением размеров и степени асимметрии ядер, продемонстрирована пригодность разработанного морфометрического анализа для быстрого прогноза генотоксических эффектов. Динамичность развития современных технологий производства веществ и материалов (в особенности - нанотехнологий) требует создания системы скрининга, позволяющей быстро и надежно выявлять вещества, обладающие потенциальной генотоксической активностью. Эта проблема встает весьма остро, т.к. у наночастиц различного происхождения всё чаще обнаруживается мутагенная и/или канцерогенная активность. Поскольку одной из основных компонент системы оценки риска является анализ стабильности генома, скрининг должен быть направлен на выявление показателей её снижения. К ним относятся эффекты, которые обнаруживаются in vivo и in vitro при действии мутагенов и канцерогенов: собственно генетические повреждения, асимметрия деления ядер, анеуплоидия, изменение пролиферативной активности клеток и клеточная гибель. Для оценки таких эффектов в исследовательской практике обычно используются цитогенетические методы: микроядерный (МЯ) тест с цитокинетическим блоком, тесты на индукцию хромосомных аберраций, метод оценки частоты сестринских хроматидных обменов и метод ДНК-комет. Каждый из этих методов требует высокой квалификации исследователя, значительной продолжительности самих исследований, сложной техники и дорогостоящих реактивов, что не позволяет использовать их для скрининга и делает актуальной задачу разработки и апробации простого, надежного и быстрого цитогенетическо-го метода прогноза генетической безопасности. В качестве такого метода мы предлагаем использовать морфометрический анализ лимфоцитов крови человека, подготовленных для анализа в МЯ тесте с цитохалазином В (ЦХВ), что позволяет оценивать симметрию деления материнского ядра на популяции двуядерных лимфоцитов. В данной публикации представлены результаты сравнительного анализа цитогенетических и морфометрических эффектов действия стандартного мутагена и прямого канцерогена N-метил-N-нитро-N-нитрозогуанидина (МННГ), использованного в качестве обучающей выборки.

Авторы:

Издание: Токсикологический вестник
Год издания: 2012
Объем: 6с.
Дополнительная информация: 2012.-N 3.-С.14-19. Библ. 18 назв.
Просмотров: 61