ДВУХСТАДИЙНЫЙ МЕТОД ПОЛУЧЕНИЯ ЦЕРУЛОПЛАЗМИНА НА ОСНОВЕ ЕГО ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ С НЕОМИЦИНОМ

Аннотация:

Описан двухстадийный хроматографический метод, позволяющий получить высокоочищенный церуло-плазмин (СР) из плазмы крови человека и из сыворотки крови крыс и кроликов с высоким выходом, в основе которого лежит взаимодействие СР с неомицином. Определены константы ингибирования оксидаз-ной активности СР человека в реакции с n-фенилендиамином для гентамицина, канамицина и неомицина. Установлено, что наименьшая величина К для неомицина (11 мкМ) совпадала с наибольшей удельной сорбцией СР на неомицин-агарозе (10 мг СР/мл сорбента). Применение ионообменной хроматографии на UNO-Sphere Q и аффинной хроматографии на неомицин-агарозе увеличивает степень очистки содержащихся в плазме 348 мг СР в 412 раз. При хранении в стерильных условиях при 37° препарат СР стабилен в течение двух месяцев. По аналогичному протоколу получены препараты высокоочищенного СР из сыворотки крови крыс и кроликов, что позволяет предположить применимость данного метода для выделения СР из плазмы и сыворотки крови других животных; выход СР по данным трех независимых опытов выделения был не менее 78%.

Авторы:

Издание: Биохимия
Год издания: 2012
Объем: 10с.
Дополнительная информация: 2012.-N 6.-С.775-784. Библ. 40 назв.
Просмотров: 45