КЛОНИРОВАНИЕ И ЭКСПРЕССИЯ ГЕНОВ ТЕРМОСТАБИЛЬНЫХ СЕКРЕТОРНЫХ МЕТАЛЛОПРОТЕИНАЗ ДВУХ ШТАММОВ BACILLUS BREVIS В КЛЕТКАХ BACILLUS SUBTILIS

Аннотация:

Клонированы и экспрессированы в клетках Bacillus slibtilis близкородственные гены нейтральных (металлосодержащих) секреторных протеиназ (К.Ф 3.4.24.4) двух штаммов Вас. brevis. Составлены их рестрикционные карты и устанонлено направление транскрипции клонированных генов. Определена термостабильность продуктов клонированных генов и их природных аналогов. Показано, что термостабильность и оптимумы протеолитической активности ферментов, экспрессируемых в клетках Вас. slibtilis, заметно уступают аналогичным параметрам аутентичных природных металлопротсиназ. Сделан вывод о возможном формировании неоптимальной пространственной структуры молекулы при экспрессии генов термофильных микроорганизмов в клетках мезофильных штаммов-реципиентов. Семейство секреторных микробных протеиназ является удобной экспериментальной моделью для исследования структурно-функциональных взаимосвязей в молекулах белков и прежде всего для выяснения молекулярных основ термостабильности f4, 5, 7-11]. Следует отметить, что использование ферментов данной группы благодаря особенностям их структуры позволяет анализировать целый комплекс молекулярных взаимодействий, включая междоменные связи, гидрофобные взаимодействия, образование солевых мостиков, специфические взаимодействия с ионами металлов и др. Мы полагаем, что общие молекулярные принципы и механизмы, которые могут быть выявлены на данной экспериментальной модели, окажутся применимыми и для белков других групп. Все это делает перспективными поиски, характеристику, клонирование и исследование особенностей экспрессии новых генов, кодирующих термостабильные протеолитические ферменты. Актуальность таких исследований определяется также высокой коммерческой значимостью термостабильных протеиназ.

Авторы:

Издание: Молекулярная генетика ,микробиология и вирусология
Год издания: 1998
Объем: 3с.
Дополнительная информация: 1998.-N 3.-С.30-32
Просмотров: 37