Экспрессия нуклеотидной последовательности пептида М2е вируса гриппа птиц в трансгенных растениях табака

Аннотация:

Пептид М2е вируса гриппа птиц А/курица/Курган/05/2005 (H5N1) был успешно синтезирован в трансгенных растениях табака. Аминотерминальный участок белка М2 длиной 22, 30 или 43 аминокислотных остатка (а.о.), включающий пептид М2е (варианты М122, Ml30 и М143, соответственно), был трансляционно слит с N-концом бета-глюкуронидазы в экспрессионном растительном векторе рВ1121. Нуклеотидная последовательность целевого фрагмента была синтезирована методом лигирования предварительно собранных олигонуклеотидов; кодонный состав последовательности был оптимизирован для экспрессии в растениях. Полученными конструкциями (рВ1М122, -130 и -143) были успешно трансформированы растения табака. В растениях, трансформированных вектором рВ1М143, слитый белок М143-бета-глюкуронидаза не синтезировался, что, возможно, связано с присутствием в этой конструкции трансмембранного домена белка М2 (а.о. 25—43 М2). В растениях, трансформированных векторами рВ1М122 и рВ1М130, с помощью вестерн-блот--анализа показана экспрессия целевого пептида М2е в составе слитых белков Ml 22-и М130-бета-глюкуронидаза, соответственно. Молекулярная масса целевого белка соответствовала расчетной; не наблюдалась его заметная деградация. В результате проведенных исследований впервые показана возможность продукции пептида М2е вируса гриппа птиц в стабильно трансформированных растениях. Полученные результаты будут использованы для разработки съедобной вакцины против гриппа на основе трансгенных растений.

Авторы:

Издание: Биотехнология
Год издания: 2012
Объем: 8с.
Дополнительная информация: 2012.-N 4.-С.18-25. Библ. 20 назв.
Просмотров: 38