АДЕНИЛОСУКЦИНАТ-СИНТЕТАЗА ДРОЖЖЕЙ SACCHAROMYCES CEREVISIAE: ОЧИСТКА И СВОЙСТВА

Аннотация:

Впервые сообщается о свойствах аденилосукцинат-синтетазы (АСС) дрожжей Saccharomyces cerevisiae. Разработана четырехстадийная схема выделения и очистки фермента из клеток штамма-продуцента, включающая хроматографию на ДЭАЭ-целлюлозе, фосфоцеллюлозе и гепарин-агарозе. Определены рН- и температурный оптимумы активности АСС (7,0 и 35° соответственно). Изучены рН- и термостабильность фермента. Нативная форма фермента - димер. Величины Км для IMP, GTP и L-аспартата равны 1,7, 0,1би 6,7 мМ соответственно. АТР не может заменить GTP в качестве субстрата, a 2'-dGTP и dd-GTP могут. 1ТР служит субстратом и как аналог GTP, и как аналог IMP. Впервые обнаружено ингибирование АСС промежуточными продуктами биосинтеза пуриновых нуклеотидов 5-амино-4-(М-сукцинокарбоксамид)- и 5-амино-4-карбомоил-имидазолрибонуклеотидами (САИКАР и АИКАР соответственно). NHzOH и аналоги аспартата не являются субстратами, но многие являются ингибиторами; для эффективного связывания важно наличие четырехуглеродного скелета и незамещенной аминогруппы; заряженность р-карбоксильной группы не обязательна. На основании результатов сравнительного анализа первичных структур и субстратных специфичностей САИКАР-синтетазы и АСС дрожжей высказано предположение о независимом происхождении этих белков.

Авторы:

Издание: Биохимия
Год издания: 1998
Объем: 8с.
Дополнительная информация: 1998.-N 6.-С.773-780
Просмотров: 98