СТРУКТУРЫ МУТАНТНЫХ НЕОРГАНИЧЕСКИХ ПИРОФОСФАТАЗ E.COLI С ЗАМЕНАМИ ОСТАТКОВ АСПАРАГИНОВЫХ КИСЛОТ 42, 65, 70 И 97 НА АСПАРАГИН

Аннотация:

Определены пространственные структуры четырех мутантных форм неорганической пирофосфатазы Е. coli (РРазы), содержащих единичную замену Asp->Asn в положениях 42, 65, 70 и 97, с разрешением 1,95; 2.15; 2,10 и 2,20 А соответственно. Два мутанта - Asp-42Asn и Asp-65Asn РРазы - получены в виде комплексов с сульфатом, который является аналогом продукта ферментативной реакции - фосфата. Сравнение структур мутантных ферментов с нативным показывает, что введение единичной аминокислотной замены не только приводит к локальным конформационным изменениям в месте расположения мутированного остатка, но и меняет положение многих функциональных групп и некоторых участков полипептидной цепи. Эти изменения и являются причиной того, что каталитические свойства мутантных пирофосфатаз становятся другими по сравнению с нативным ферментом. Связывание сульфата в активном центре мутантных РРаз, как и в случае соответствующего комплекса нативного фермента, изученного ранее, приводит к асимметрии субъединиц, которая проявляется в разной ориентации сульфата и ряда функциональных групп, а также в изменении укладки гексамеров в кристалле и параметров кристаллической ячейки.

Авторы:

Издание: Биохимия
Год издания: 1998
Объем: 15с.
Дополнительная информация: 1998.-N 6.-С.797-811
Просмотров: 16