МЕТОД ПОЛУЧЕНИЯ МИКРОЧИПОВ С ПОМОЩЬЮ СОПОЛИМЕРИЗАЦИИ С АКРИЛАМИДОМ

Аннотация:

В настоящее время биологические микрочипы используют для анализа ДНК [1, 2], выявления мутаций [3], при анализе экспрессии генов и идентификации микроорганизмов, в медицинской диагностике [4] и многих других областях [5-9]. Существует несколько способов производства таких микрочипов. Среди них фотолитографический способ фирмы "Affymetrix" [6], который позволяет получать ДНК/РНК-микрочипы с большим количеством ячеек размером до 5 мкм. Недостатком этого метода может быть низкая чистота иммобилизованных одноцепочечных олигонуклеотидов. Описаны также методы пришивки олигонуклеотидов и белков к различным поверхностям (стекло, пористое стекло и др.) [1, 3, 5, 8]. Эти методы требуют больших затрат, а получаемые ячейки микрочипа обладают меньшей емкостью по сравнению с ячейками, полученными методом пришивки к объемным гелевым элементам, который разрабатывается в нашей группе [7, 9]. Наш метод позволяет иммобилизовать охарактеризованные олигонуклеотиды и белок с более высокой емкостью иммобилизации. Недавно фирма "Mosaic Technologies" (http:\\www.mostek.com) разработала реагент "Acrydite-TM phosphoramidite", с помощью которого синтезированы олигонуклеотиды для сополимеризации с акриламидом на концах оптического волокна, которое можно рассматривать как своеобразный микрочип. Однако такая технология не позволяет проводить параллельный анализ большого количества мелких элементов. В данной работе описан новый способ получения олигонуклеотидных и белковых микрочипов методом фотосополимеризации (МФ) с акриламидом. Этот метод позволяет в 10 раз сократить линейные размеры микрочипа, уменьшив размер объемной гелевой ячейки со 100 х 100 х 25 мкм до 10х10х5 мкм (рис. 1а), при сохранении столь же высокой емкости иммобилизации, как и в работах [7,9].

Авторы:

Издание: Молекулярная биология
Год издания: 1998
Объем: 3с.
Дополнительная информация: 1998.-N 5.-С.923-925
Просмотров: 41