ТЕЗИСЫ ДОКЛАДОВ И СООБЩЕНИЙ, ПРЕДСТАВЛЕННЫХ НА III КОНФЕРЕНЦИЮ ОБЩЕСТВА КЛЕТОЧНОЙ БИОЛОГИИ (Санкт-Петербург, 16—18 октября 2012 г.)

Аннотация:

ЦИТОЛОГИЯ. ИССЛЕДОВАНИЕ ЗАВИСИМОСТИ ИНДУКЦИИ АПОПТОТИЧЕСКОЙ ПРОГРАММЫ ИНГИБИТОРАМИ HDAC ОТ ЭКСПРЕССИИ БЕЛКА GADD45a. ( М. В. Абрамова, О. О. Гнедина,Е. А. Филиппова,С. Б. Светликова,В. А. Поспелов) Ингибиторы гистоновых деацетилаз (HDIs) подавляют пролиферацию опухолевых клеток, индуцируя апоп-тоз и(или) остановку клеточного деления. Благодаря этому в настоящее время большое внимание уделяется HDIs как новому многообещающему классу противоопухолевых препаратов. Однако точные механизмы антипроли-феративного действия HDIs остаются невыясненными. Мы исследовали влияние экспрессии белка Gadd45a на способность ингибиторов гистоновых деацетилаз (HDIs) вызывать апоптотическую гибель в эмбриональных фиб-робластах мыши, трансформированных онкогенами Е1А и сНа-ras (клетки mERas). Как было показано ранее, в контрольных трансформантах HDIs вызывали необратимый блок клеточного цикла, индукцию клеточного старения и активацию антиапоптотической NF-кВ-зависимой программы. Однако оказалось, что в клетках с нокаутом по гену-мишени р53, кодирующему Gadd45a (growth arrest and DNA damage-inducible gene, клетки Gadd45a-/-), HDIs вызывают апоптотическую гибель. В данной работе был проведен сравнительный анализ влияния HDIs на баланс про- и антиапоптотических факторов в клетках Gadd45a+/+ и Gadd45a-/- mERas. Было показано, что отсутствие HDIs-индуцированного апоптоза в клетках mERas обусловлено активацией антиапоптотического транскрипционного фактора NF-кВ. В отличие от клеток Gadd45a+/+ в клетках Gadd45a-/- не происходит активации ингибиторами HDAC основных компонентов NF-kB сигнального пути. Так, антиапоптотические белки XIAP и Bcl-XL активируются HDIs в контрольных трансформантах, но они не изменяются либо даже снижаются в трансформантах Gadd45a-/-. Хотя экспрессия проапоп-тотического гена Bim также активируется HDIs в контрольных трансформантах, в клетках Gadd45a-/- он эксп-рессируется на высоком конститутивном уровне. HDIs-зависимая экспрессия проапоптотического белка Вах также зависит от присутствия Gadd45a. Так, в контрольных клетках mERas экспрессия Вах увеличивается при действии HDIs, тогда как в клетках Gadd45a-/— наблюдается постоянно высокий уровень белка Вах. При этом важно отметить, что в контрольных трансформантах накапливается цитозольный Вах, в то время как в Gadd45a-/- наблюдается постоянно высокий уровень Вах, связанного с митохондриями. Поскольку многие проапототические гены, в том числе Вах, являются р53-зависимыми генами, его высокое митохондриальное содержание в клетках Gadd45a—/- позволяет предполагать роль р53 в HDIs-индуцированном апоптозе. Важно, что в клетках Gadd45a-/- наблюдается повышенное содержание как тотального р53, так и его фосфорилирован-ной формы по Ser-15. Полученные данные позволяют предположить, что делеция Gadd45a, приводящая к нарушению эксцизионной репарации ДНК, тем самым вызывает активацию сигналинга DDR, в частности фосфори-лирование р53. В результате постоянной активности р53 клетки Gadd45a-/- коммитированы к апоптозу различными факторами, включая HDIs. Поэтому использование HDIs в комбинации с ингибиторами функции Gadd45 может иметь перспективы для терапии рака. Работа выполнена при финансовой поддержке Российского фонда фундаментальных исследований (проект 12-04-01554-а). РАЗМЕР ГЕНОМА И СОДЕРЖАНИЕ ДНК В ХРОМОСОМАХ ТРЕХ ВИДОВ СЕРЫХ ХОМЯЧКОВ (RODEN-TIA, CRICETIDAE, CRICETULUS). (О Н. А. Агафонова, В. П. Кораблев, Г. А. Сакута, Ю. М. Розанов,Б. Н. Кудрявцев) . Определен размер генома и измерено содержание ДНК в индивидуальных хромосомах трех близкородственных видов хомячков группы «barabensis». Размер диплоидного генома, измеренный с помощью проточной ци-тометрии в пикограммах — пг (1042 г) ДНК на ядро, составил у самцов Cricetulus barabensis (2n = 20) — 6.366 пг, С. griseus (2n = 22) 6.660 пг и С. pseudogriseus (2п = 24) — 6.718 пг, а у самок 6.435, 6.746 и 6.819 пг соответственно. Пластинки метафазных хромосом получали из костного мозга животных. Для определения содержания ДНК в индивидуальных хромосомах вначале их идентифицировали, используя дифференциальное Q-окрашивание с помощью флуоресцентного красителя Hoechst 33258, а затем те же хромосомы после удаления красителя Hoechst окрашивали по Фёльгену, используя в качестве реактива типа Шиффа этидиум бромид-802. и др. тезисы докладов.

Авторы:

Издание: Цитология
Год издания: 2012
Объем: 60с.
Дополнительная информация: 2012.-N 9.-С.659-718. Библ. 0 назв.
Просмотров: 56