Тромболитическая и фибринолитическая активность бактериальных протеаз

Аннотация:

В медицинской практике все чаще применяют протелитические ферменты микроорганизмов. Особое внимание исследователей привлекают протеиназы, обладающие фибринолитическими свойствами, а также способные лизировать тромбы. Ранее были выделены и очищены до гомогенного состояния глутамилзндопептидаза, субтили-зиноподобная протеиназа и металлозндопептидаза Bacillus pumilis 3-19, секретируемые рекомбинантным штаммом В. subtilis JB 203Б. Проведен анализ тромболитических, фибринолитических и антикоагулянтных свойств рекомбинантных ферментов. Показано, что все исследуемые протеиназы способны эффективно лизировать тромб. В условиях in vitro субтилизиноподобная протеиназа и глутамилзндопептидаза рекомбинантного штамма В. subtilis обладают антикоагулянтной активностью. Металлопротеи-наза же не способна повлиять на процесс тромбинообра-зования. Субтилизиноподобная протеиназа и глутамилзндопептидаза обладают фибринолитической активностью и активаторной способностью по отношению к плазминоге-ну. Металлопротеиназа не проявляет фибринолитических свойств. В связи с широким распространением сердечнососудистых заболеваний актуальным является поиск новых ферментов с высокой биологической активностью, специфичностью и низкой токсичностью. Ключевые сАова: глутамилзндопептидаза, субтилизиноподобная протеиназа, металлопротеиназа, тромболити-ческие и фибринолитические свойства, антикоагулянтная активность. Сериновые протеиназы бактерий — одна из наиболее изучаемых групп протеолитических ферментов. Они интенсивно используются в фармацевтической промышленности, тканевой инженерии, системной энзимотерапии .Одной из перспективных областей применения протеиназ является создание на их основе тромболитических препаратов. Другой чрезвычайно интересной и перспективной с практической точки зрения группой ферментов являются метцинкиновые эндопептидазы. Ранее было показано, что бактерии Bacillus pumilus 3-19 секретируют в среду несколько протеиназ, среди которых доминируют сериновые: субтилизиноподобная протеиназа и глутамилзндопептидаза [4]. Позже выяснили, что наряду с сериновыми протеиназами бактерии В. pumilus выделяют в среду также металлоэндопептидазу. Гены данных ферментов были клонированы и секвенированы, последовательности зарегистрированы в Международной базе данных. Была изучена экспрессия этих генов в рекомбинантном штамме В. subtilis. Соответствующие белки были выделены в гомогенном состоянии и подробно охарактеризованы . Разработка новых эффективных лекарственных препаратов на основе ферментов бактериального происхождения является перспективным направлением современной медицины, микробиологии и биотехнологии. Представляет интерес изучение тромболитических, фибринолитических и антикоагулянтных свойств эндопептидаз В. pumilus 3-19, секретируемых рекомбинантным штаммом В. subtilis. Для определения тромболитических свойств протеиназ аликвоту крови крыс смешивали с раствором тромбина и выдерживали в течение 10 мин в водяном термостате при 37°С для образования сгустков. К сгусткам добавляли раствор препарата фермента и помещали в водяной термостат Св контрольные пробирки добавляли 0,145 М NaCI). Отмечали время полного лизиса свертков. Способность белков предотвращать образование фибриновых свертков исследовали с помощью тромбоэластографа. Аликвоту плазмы крови человека смешивали с препаратом фермента и выдерживали

Авторы:

Издание: Клеточная трансплатология и тканевая инженерия
Год издания: 2012
Объем: 3с.
Дополнительная информация: 2012.-N 3.-С.49-51. Библ. 14 назв.
Просмотров: 171