Цитофлуориметрическая характеристика влияния РНКаз на клетки про- и эукариот

Аннотация:

Цитотоксичные рибонуклеазы (РНКазы] — перспективные препараты для терапии злокачественных новообразований. Расширение спектра модельных объектов, по отношению к которым охарактеризовано действие РНКаз, позволит дать точную оценку селективности действия данных препаратов. С помощью проточной цитометрии оценивали действие рибонуклеазы Bacillus intermedius (биназы) и РНКазы А быка на клетки эпителия легкого эмбриона коровы (ЛЭК) и Escherichia coli К12. Апоптоз клеток ЛЭК выявляли с помощью двойного окрашивания Аннексином-FITC и йодидом пропидия (PI). Жизнеспособность клеток Е. coli оценивали с помощью окрашивания PI. Ни в одной из исследованных концентраций (100 и 300 мкг/мл] биназа и РНКаза А не проявили цитотоксических свойств в отношении клеток ЛЭК и Е. coli К12. Низкая токсичность исследованных РНКаз в отношении Е. coli позволяет предположить, что присутствие биназы и РНКазы А в концентрациях, способных проявлять противоопухолевую активность, не будет иметь значительного влияния на микробную флору тканей в перспективных исследованиях in vivo. Продемонстрированное отсутствие апоптозиндуцирующей активности биназы в отношении клеток ЛЭК подтверждает селективность действия данной РНКазы на опухолевые клетки.Рибонуклеазы [РНКазы) — важнейшие ферменты метаболизма РНК, функции которых заключаются в расщеплении мРНК, превращении предшественников РНК в зрелые формы, продукции малых ре-гуляторных РНК, деградации определенных типов РНК. Клетка содержит около 20 видов экзо- и эн-дорибонуклеаз, которые могут входить в состав надмолекулярных комплексов и проявлять высокую специфичность к определенным нуклеотидным последовательностям и структурам. В последние годы особое внимание уделяется биологическим эффектам рибонуклеаз, таким как контроль роста кровеносных сосудов, токсичность по отношению к клеткам опухолей, противовирусная активность. Современные представления о роли и функциях РНКаз в клетках позволяют рассматривать эти ферменты как перспективную альтернативу традиционным химиотерапевтическим средствам в щадящей терапии злокачественных новообразований. На сегодняшний день известно значительное количество РНКаз, обладающих селективным цитотоксическим действием по отношению к клеткам опухолей. Наиболее известным ферментом этого ряда является РНКаза лягушки Rana plpiens — онконаза , успешно проходящая клинические испытания как противоопухолевый препарат в терапии злокачественных новообразований почек, поджелудочной железы и легких. Для РНКаз, как агентов противоопухолевой терапии, основное значение имеет фактор избирательного действия по отношению к опухолевым клеткам. От деструктивного действия РНКаз млекопитающих клетку защищает эволюци-онно сложившаяся система защиты, опосредованная действием специфического цитозольного ингибитора РНКаз (I/IP) [5]. Поэтому для разработки потенциальных противоопухолевых средств весьма перспективны РНКазы, не относящиеся к РНКазам млекопитающих и нечувствительные к действию ИР [6]. К таковым относятся микробные РНКазы. Кроме того, широкие возможности для биоинженерии и практической наработки этих ферментов делает их особо привлекательными для разработки новых терапевтических средств.

Авторы:

Издание: Клеточная трансплатология и тканевая инженерия
Год издания: 2012
Объем: 4с.
Дополнительная информация: 2012.-N 3.-С.62-65. Библ. 23 назв.
Просмотров: 89