РНКаза с противоопухолевым действием (биназа) вызывает изменение клеточной проницаемости

Аннотация:

Ряд РНКаз, среди которых есть и микробные ферменты, обладает протовоопухолевым действием, механизм которого не ясен. В настоящей работе исследован начальный этап взаимодействия РНКаз с эукариотическими клетками, связанный с изменением их проницаемости для ионов и макромолекул. На клеточных культурах карциномы легких А54Э, эмбриональной почки человека НЕК и дрожжах Candida с использованием анализа поглощения изотопа 45Саг+ либо флуоресцентного красителя Fura-2/АМ изучено влияние цитотоксичной РНКазы Bacillus intermed/us (биназы] на накопление внутриклеточного кальция. Изменение проницаемости клеток А549, обработанных биназой, проанализировано по проникновению меченого трипановым синим альбумина через клеточный монослой. Выживаемость клеток А549 оценена по активности митохондриальных де-гидрогеназ, восстанавливающих производные тетразолия, стабильность мембран эритроцитов оценена по выходу гемоглобина при осмотическом шоке. Установлено, что биназа увеличивает проницаемость клеток высших и низших эукариот для ионов кальция. Клетки А549 под действием биназы также усиливают проницаемость для макромолекул. Обработка биназой защищает эритроциты от осмотического шока. Следующее за увеличением проницаемости протекторное либо цитотоксическое действие биназы реализуется в зависимости от типа клеток, где ключевую роль играет экспрессия КСа каналов и определенных онкогенов, в частности, онкогенов семейства ras. Полученные данные подтверждают принципиальную важность увеличения клеточной проницаемости как первичного этапа в механизме проявления биологических эффектов биназы. Биологические функции рибонуклеаз (РНКаз), связанные с регуляцией экспрессии генов, роста и развития клеток, защитой от патогенов и индукцией апоптоза, привлекают пристальное внимание исследователей. РНКазы семенников быка (BS-РНКаза), овоцитов лягушки Rana pipiens (онконаза), бактерий Streptomyces aureofaciens [РНКаза Sa3), Bacillus intermedius (биназа) рассматривают как перспективные агенты альтернативной химиотерапии злокачественных новообразований. Целенаправленный поиск терапевтически значимых ферментов среди РНКаз млекопитающих не всегда тактически оправдан в связи с эволюционно сформировавшейся системой защиты клетки млекопитающих от излишней активности собственных РНКаз, опосредованной действием специфического цитозольного их ингибитора. В связи с этим, особый интерес вызывают РНКазы, филогенетически далекие от своих аналогов у млекопитающих, такие как РНКазы амфибий, грибов и микроорганизмов, нечувствительные к действию ингибитора РНКаз млекопитающих.Нами ранее показано, что селективность действия РНКаз по отношению к опухолевым клеткам определяется молекулярными характеристиками фермента, прежде всего катионностью,а также экспрес-сионным профилем неопластической клетки, где маркерной для проявления избирательной цитоток-сичности является экспрессия онкогенов ras, kit и AML-ETO .Вероятно, продукты гидролиза клеточной РНК могут принимать участие в процессе РНК-интерференции, подавляя экспрессию маркерных онкогенов. Однако механизмы цитотокси-ческого действия РНКаз до конца не ясны. Особенно мало сведений о первом этапе взаимодействия экзогенных РНКаз с опухолевой клеткой. Для BS-РНКазы зафиксированы адсорбция и последующая

Авторы:

Издание: Клеточная трансплатология и тканевая инженерия
Год издания: 2012
Объем: 5с.
Дополнительная информация: 2012.-N 3.-С.72-76. Библ. 26 назв.
Просмотров: 156