Мононуклеарные клетки пуповинной крови человека, трансфицированные двухкассетными плазмидами (vegf + нейротрофический фактор) для терапии бокового амиотрофического склероза

Аннотация:

Для увеличения жизнестойкости нервных клеток при нейродегенеративных заболеваниях после травматических и ишемических повреждений многолетние исследования in vitro и in vivo выявили наиболее значимые нейротрофические и нейропротекторные факторы, которые могут быть применены в качестве лекарственных препаратов. К ним относятся мозговой нейротрофический фактор (BDNFJ, глиальный нейротрофический фактор (GDNFJ, инсулиноподобный фактор роста (IGF) и сосудистый эндотелиальный фактор роста (VEGF). Одним из перспективных способов доставки поддерживающих выживание нейронов факторов считается трансплантация генетически модифицированных клеток, сверхэкспрессирующих рекомбинантные терапевтические гены. В статье приводится технология создания клеточных носителей терапевтических генов на основе мононуклеарной фракции пуповинной крови человека и двухкассетных плаз-мид, одновременно экспрессирующих два терапевтических гена. Эффективность экспрессии трансгенов изучена in vitro методом ПЦР-РВ. Анализ выживания, миграции и фенотипа генетически модифицированных клеток исследовали через 2 нед. после трансплантации трансгенным мышам с фенотипом бокового амиотрофического склероза. Ключевые слова: генно-клеточная терапия, боковой амиотрофический склероз, мононуклеарные клетки пуповинной крови человека, сосудистый эндотелиальный фактор роста, основной фактор роста фибробластов, глиальный нейротрофический фактор, нейронная молекула адгезии L1. Целесообразность генетической модификации мононуклеарных клеток пуповинной крови для клеточной терапии в регенеративной медицине обусловлена: повышением жизнеспособности трансплантированных клеток в тканях реципиента; адресной доставкой специфических ростовых и трофических факторов в область дегенерации; направленной дифференцировкой прогениторных и стволовых клеток пуповинной крови. Ранее на основе плазмидного вектора pcDNA3.1 нами были получены генетические конструкции, зкспрессирующие нейрональную молекулу адгезии И (pcDNA-hL1 САМ), сосудистый эндотелиальный фактор роста (pcDNA-VEGF121, pcDNA-VEGF165, pcDNA-VEGF189), фактора роста фибробластов CpcDNA-FGF2), глиальный нейротрофический фактор CpcDNA-GDNF). Согласно нашей гипотезе, адресную доставку терапевтического гена в нервную ткань можно эффективнее осуществлять с помощью генетически модифицированных мононуклеарных клеток пуповинной крови, одновременно экспрессирующих терапевтический ген и ген молекулы адгезии нервных клеток. Нами впервые была создана генетическая конструкция, кодирующая VEGF и L1 САМ. Экспрессия гена молекулы адгезии нейронов в генетически модифицированных клетках может не только повысить их способность к адресной миграции, но и выживаемость в нервной ткани реципиента, а следовательно, увеличится продолжительность

Авторы:

Издание: Клеточная трансплатология и тканевая инженерия
Год издания: 2012
Объем: 6с.
Дополнительная информация: 2012.-N 3.-С.92-97. Библ. 12 назв.
Просмотров: 97