Выделение и культивирование миофибробластов печени крыс методом эксплантации

Аннотация:

При развитии фиброза печени источником соединительной ткани являются миофибробласты, происходящие из двух популяций клеток печени: звёздчатых клеток печени и портальных фибробластов. Маркёром миофибробластов является экспрессия aльфа-гладкомышечното актина (aльфа-SMA). Отличительным признаком миофибробластов, происходящих из звёздчатых клеток печени, является сохранение экспрессии маркёра звёздчатых клеток — десмина. Процесс активации, пролиферации и трансдифференцировки клеток в миофибробласты находится в тесной зависимости от активности транскрипционного фактора NF-kB и его ингибитора IkBa. Целью нашей работы было получение культуры миофибробластов печени, изучение их происхождения, фенотипа, связи экспрессии NF-kB и IkBa с процессами активации и трансдифференцировки звёздчатых клеток печени в миофибробласты. Для этого методом эксплантации мы выделили гетерогенную популяцию клеток печени крысы. Практически все полученные нами клетки экспрессировали десмин и aльфа-SMA. На основании этого мы предполагаем, что полученная нами культура миофибробластов являлась производной звёздчатых клеток печени, а единичные десмин-отрицательные клетки — производными портальных фибробластов. Таким образом, звёздчатые клетки печени обладают большим потенциалом к активации, росту, пролиферации и трансдифференцировке в миофибробласты по сравнению с портальными фибробластами. Подтверждением активированного состояния клеток явилась устойчивая экспрессия NF-kB и его ингибитора IkBa во всех клетках на протяжении всего эксперимента. Звёздчатые клетки печени (ЗКП, клетки Ито, или перисинусоидальные клетки печени] — одна из самых малоисследованных популяций клеток в печени млекопитающих. Доказано, что они играют ключевую роль в обмене и накоплении витамина А, гистогенезе и регенерации печени. Вследствие их высокой биосинтетической активности и способности транс-дифференцироваться в миофибробласты, которые синтезируют макромолекулы межклеточного матрик-са соединительной ткани, ЗКП считали главными «виновниками» развития цирроза и фиброза печени. Однако в последнее время появляется всё больше данных о том, что, помимо ЗКП, источником миофибробластов могут являться фибробласты портальных трактов, или портальные фибробласты СПФ). Таким образом, на сегодняшний день обе эти популяции клеток, ЗКП и ПФ, рассматриваются как источник миофибробластов и соединительной ткани при фиброзе печени .Общепринятым маркёром миофибробластов является aльфа-гладкомышечный актин (a-SMA). Отличительным признаком миофибробластов, происходящих из ЗКП, является сохранение в цитоскелете миофибробластов десмина — одного из компонентов цитоскелета ЗКП.

Авторы:

Издание: Клеточная трансплатология и тканевая инженерия
Год издания: 2012
Объем: 4с.
Дополнительная информация: 2012.-N 3.-С.112-115. Библ. 9 назв.
Просмотров: 167