КЛОНИРОВАНИЕ, ВЫДЕЛЕНИЕ И ХАРАКТЕРИСТИКА ГАЛАКТОМАННАНГИДРОЛИЗУЮЩИХ ФЕРМЕНТОВ Myceliophthora thermophila

Аннотация:

Гены бета-маннозидазы массой 97 кДа второй семьи гликозилгидролаз (ьМапп9), бета-маннаназы массой 48 кДа пятой семьи гликозилгидролаз (ьМап2) и а-галактозидазы массой 60 кДа 27-й семьи гликозилгидролаз (aGall), кодирующие галактоманнангидролизующие гликозилгидролазы Myceliophthora thermophila CI, были успешно клонированы. Рекомбинантные ферменты были очищены до гомогенного состояния и охарактеризованы. ьМапп9 продемонстрировала только экзоманнозидазную активность (значения Кm и kcat по n-нитрофенил-бета-D-маннопиранозиду были равны 0,4 мМ и 15 с 1 соответственно, а оптимальные значения рН и температуры — 5,3 и 40° соответственно). ьМап2 проявила активность по отношению к галактоманнанам (ГМ) различной структуры. Было установлено, что значения Кт и составляют 1,3 мг/мл и 67 с-1 по карубину, оптимальные значения рН и температуры — 5,2 и 69° соответственно. aGall была одновременно активна по n-нитрофенил-альфа-D-галактопиранозиду (ПНФГ) и ГМ различной структуры. Было установлено, что значения Кm и kcat составляют 0,08 мМ и 35 с-1 по ПНФГ, а оптимальные значения рН и температуры — 5,0 и 60° соответственно.

Авторы:

Издание: Биохимия
Год издания: 2012
Объем: 11с.
Дополнительная информация: 2012.-N 11.-С.1556-1566. Библ. 26 назв.
Просмотров: 49