ГЕНЕТИЧЕСКИЕ ДЕТЕРМИНАНТЫ СЕКРЕТИРУЕМЫХ ИНГИБИТОРОВ ЛИЗОЦИМА И АНТИЛИЗОЦИМНЫЙ ФЕНОТИП ЭНТЕРОБАКТЕРИЙ

Аннотация:

Определение взаимосвязи генетических детерминант секретируемых ингибиторов лизоцима с антилизоцимным фенотипом энтеробактерий. Материалом для исследования послужили по 50 культур негемолитических Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, изолированных из фекалий пациентов с I — II степенью дисбиоза кишечника, и Salmonella enterica, выделенных от больных ОКИ и реконвалесцентных сальмонеллезных бактерионосителей. Выделение матричной ДНК исследуемых штаммов для ПЦР проведено комплектом «ДНК-Экспресс» («Литех», Россия). ПЦР-скрининг генов секретируемых ингибиторов лизоцима ivyC и pliC осуществлен на основе праймеров и реагентов ООО «Синтол». Детекция ампликонов производилась методом агарозного гель-электрофореза. Определение общей антилизоцимной активности (АЛА) осуществляли чашечным методом, секретируемого и сорбционного компонента АЛА — фотометрическим методом по О.В.Бухарину и др. (1999) и по В.Ю.Соколову и А.П.Луда (1987) соответственно. Скрининг наличия генов хромосомной локализации: ivyC у эшерихий и клебсиелл и pliC у сальмонелл методом ПЦР показал их убиквитарное распространение среди исследованных культур. Поиск гомолога гена pliC, характерного для плазмиды вирулентности К. pneumoniae, выявил положительный результат в 19+5,5% случаев. Наиболее низкий уровень AЛA отмечался у носителей только гена ivyC, составляя в среднем 2,8±0,6 мкг/млхОП, тогда как у всех энтеробактерий, имеющих ген pliC, значения АЛА в среднем составляли 4+0,3 мкг/млхОП. Антилизоцимная активность энтеробактерий является частью общего механизма лизоцимрезистентности микроорганизмов и определяется наличием генов секретируемых ингибиторов лизоцима. Применение молекулярно-генетического подхода в виде разработанной экспериментальной тест-системы на основе метода ПЦР позволило выявлять гены секретируемых ингибиторов лизоцима в скрининговом режиме. Высокий уровень секреторной АЛА сопряжен с наличием гена pliC, тогда как у носителей гена ivyC выявляли более низкие значения признака.

Авторы:

Издание: Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии
Год издания: 2012
Объем: 5с.
Дополнительная информация: 2012.-N 6.-С.8-12. Библ. 12 назв.
Просмотров: 96