МЕТОД КОЛИЧЕСТВЕННОЙ ОЦЕНКИ АНТИМИКРОБНОГО ДЕЙСТВИЯ ЙОДСОДЕРЖАЩИХ ПРЕПАРАТОВ

Аннотация:

Разработка новых препаратов для этиотропной терапии инфекционных заболеваний диктует необходимость поиска новых подходов и методов оценки эффективности их специфического действия. В последние годы появились сообщения о принципиально новых йодсодержащих соединениях, оказывающих широкое антимикробное действие [2, 3, 6]. Лекарственные формы, созданные на основе этих соединений, показали высокую эффективность при эмпирической этиотропной терапии маститов, эндометритов, инфицированных ран, ожогов, диарей, копытной гнили и других заболеваний сельскохозяйственных животных. Вместе с тем исследования в опытах in vitro с использованием качественных и количественных методов определения чувствительности к антибактериальным препаратам [4] не соответствовали очевидному терапевтическому эффекту, а также теории биологической активности галоидных соединений В. О. Мохнача [5]. Целью настоящей работы явилось усовершенствование количественного метода определения чувствительности различных видов микроорганизмов к йодсодержащим соединениям. Материалы и методы. Испытуемые препараты. Из числа йодсодержащих соединений отобрано 12 препаратов ряда трийодидов 1,2,3-триалкилбензимидазолия. Вначале трийодиды 1,2,3-триалкилбензимидазолия растворяли в смеси ацетон стеариновая кислота (20:1) до конечной концентрации 100 мг/мл, затем в физиологическом растворе (рН 7,0-7,2) до концентрации 10 мг/мл, получая исходную суспензию. Полученную суспензию разливали в 4 пробирки по 2 мл. Из каждой пробирки делали ряд 10-кратных разведений в стерильном физиологическом растворе до концентрации препарата от 10 000 до 0,1 мкг/мл (0,2 мл раствора препарата предыдущей концентрации и 1,8 мл физиологического раствора). Контролем служили физиологический раствор и смесь стеариновой кислоты с ацетоном в концентрациях, эквивалентных максимальной концентрации, содержащейся в пробирке с разведением препарата 10 000 мкг/мл. Для исследования антимикробного действия каждой серии препарата на 4 тест-штамма микроорганизмов использовали 4 ряда по 8 пробирок со следующими концентрациями препаратов (в мкг/мл): 10 000-1000-100-10-1-0,1-0,01-К-1К-2. Каждое разведение препарата исследовали в 3 повторах. Тест-штаммы. В работе были использованы музейные штаммы микроорганизмов, занимающих различное систематическое положение, согласно определителю Берги [1]: грамположительные кокки - Staphilococclis aureus-209p; грамотрицательные палочки - Escherichia coli 88; спорообразующие палочки - Clostridium difficile 4938 и грибы - Candida albicans 674. Из агаровых культур St. aureus-209p, Е. coli 88, С. difTicile-4938, выращенных при 37 + 0,5°С в течение 18-24 ч и С. albicans 674, выращенной при 24 + 0,5°С в течение 28-72 сут, готовили взвеси, соответствующие 10^ м.т/мл по стандарту мутности для Е. coli. Взвеси 10-кратно разводили до концентрации 10 м.т/мл. Питательные среды. Посев тест-штаммов проводили на плотные и жидкие питательные среды: St. aureus и Е. coli - на мясопептонные, содержащие 0,2% глюкозы, С. difficile - на среду Вильсон-Блера, С. albicans - на среду Сабуро. Ход исследования. В каждую из опытных и контрольных пробирок вносили по 0,2 мл культуры, содержащей 10^ м.т/мл, разводя ее таким образом в 10 раз и получая конечную концентрацию микроорганизмов в суспензии соединения 10^ м.т/мл. После 15- и 60-минутной экспозиции проводили высевы из исследуемых растворов по 0,2 мл на соответствующие жидкие и плотные питательные среды. Посевы со St. aureus, Е. coli, С. difficile инкубировали при 37 + 0,5°С, С. albicans - при 24 + 0,5°С в течение 18-24 и 72 ч соответственно. Затем проводили контроль роста микроорганизмов в пробирках с жидкими питательными средами. Из пробирок, в которых наблюдался рост, делали высев на соответствующие питательные среды по 0,1 мл, растирали шпателем и инкубировали. При учете результатов отмечали последнюю пробирку с полной задержкой роста микроорганизмов и отсутствием роста на плотных питательных средах при первичном посеве и высеве из жидкой питательной среды. Концентрация препарата в этой пробирке являлась минимальной бактерицидной для испытуемого штамма и определяла его чувствительность к данной серии препарата.

Авторы:

Издание: Клиническая лабораторная диагностика
Год издания: 1998
Объем: 3с.
Дополнительная информация: 1998.-N 1.-С.44-46
Просмотров: 80