Дальневосточный государственный медицинский университет Поиск | Личный кабинет | Авторизация
Поиск статьи по названию
Поиск книги по названию
Каталог рубрик
в коллекциюДобавить в коллекцию

ИММУНОТРОПНЫЕ ЭФФЕКТЫ РОНКОЛЕЙКИНА НА ФОНЕ ПРОТИВОВИРУСНОЙ ТЕРАПИИ ХРОНИЧЕСКОГО ГЕПАТИТА С

Текст статьи доступен по ссылке: http://www.fesmu.ru/dmj/20124/2012407.aspx

Полный текст
УДК 616.36-002.2-085.37
Л.Ф. Скляр, Е.В. Маркелова, Ю.А. Ли, И.С. Горелова
Иммунотропные эффекты ронколейкина на фоне противовирусной терапии хронического гепатита С
Владивостокский государственный медицинский университет, 690002, пр. Острякова, д.2, тел.: 8-(423)-242-97-78, е-mail: mail@vgmu.ru, г. Владивосток
Контактная информация: Л.Ф. Скляр, e-mail: lidiya.sklyar@hotmail.com
Резюме:
Противовирусная терапия при хроническом вирусном гепатите С должна осуществляться с проведением иммунореабилитационных мероприятий, направленных, в первую очередь, на стимуляцию клеточного звена иммунной системы и процессы элиминации циркулирующих иммунных комплексов. В данной работе изучалась динамика концентраций молекулярных фракций циркулирующих иммунных комплексов, содержания иммуноглобулинов и оценка показателей фагоцитоза на фоне комплексного лечения хронического вирусного гепатита С, включающего в себя традиционную противовирусную терапию в составе пролонгированных интерферонов в сочетании с рибавирином и иммунокорригирующую терапию ронколейкином. Использование ронколейкина в составе комплексного лечения ХВГС определяет возможность создания новых оригинальных протоколов лечения.
Ключевые слова:
гепатит С, ронколейкин, иммунореабилитация


L.F. Sklyar, Е.V. Маrkelova, Y.А. Lie, I.S. Gorelova
Immunotropic effect of ronkoleukin at the background of chronoc hepatitis C therapy
Vladivostok State Medical university, Vladivostok
Summary:
Hepatitis C antiviral therapy should be followed by immune rehabilitation measures, first of all, aimed at T-cell immunity stimulation and elimination of circulating immune complexes. We studied concentration dynamics of molecular fractions of circulating immune complex, immunoglobulins and phagocytosis indices during combined hepatitis C antiviral therapy, including traditional antiviral therapy (PEG-ineterferon+ribavirin) and immunotropic component (Ronkoleukin). Ronkoleukin in combined hepatitis C antiviral therapy makes possible to work out a new original treatment protocols .
Key words:
hepatitis C, ronkoleukin, immune rehabilitation
Введение


Хроническая вирусная инфекция характеризуется постоянным наличием антигена в организме, что, соответственно, приводит к повышению образования циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК). Снижение реактивности клеточного звена адаптивного иммунитета может совпадать с понижением функциональной активности фагоцитирующих клеток, что, в свою очередь, также ведет к увеличению уровня ЦИК [8, 11]. Известно, что макрофаги и нейтрофильные гранулоциты являются ключевыми клетками, участвующими в утилизации иммунных комплексов из периферической крови [1, 11]. При Т-клеточном иммунодефиците дополнительная антигенная нагрузка может привести к активации антиген-неспецифических механизмов иммунитета (например, связанных с двойными негативными лимфоцитами), что малоэффективно для элиминации антигенов, и, с другой стороны, является основой формирования аутоиммунных реакций и лимфопролиферативных заболеваний [1, 2]. У пациентов с хроническим вирусным гепатитом (ХВГ) вторичная иммунная недостаточность характеризуется снижением относительного и абсолютного уровня CD3+, CD4+ и CD8+ клеток. При этом количество В-лимфоцитов компенсаторно повышается. Повышение содержания В-клеток сопровождается усилением их функциональной активности с гиперпродукцией иммуноглобулинов и циркулирующих иммунных комплексов, что подтверждает важную роль ЦИК в иммунопатологических процессах при ХВГ независимо от этиологического фактора [4, 10]. При выборе лечебной тактики необходимо учитывать размер ЦИК. Так, при наличии в циркуляции крупных ЦИК, необходима стимуляция фагоцитоза для их удаления. При преобладании мелких и средних патогенных ЦИК необходимы мероприятия по их укрупнению (УФ-облучение крови, плазмаферез и т.п.) с последующим стимулированием систем, ответственных за клиренс ЦИК. Известно, что в запуске и координации адаптивных механизмов иммунореактивности решающее значение имеют цитокины, в частности, интерейкин-2 (ИЛ-2) [5]. Дефицит эндогенного ИЛ-2 может приводить к нарушениям в клеточной системе иммунитета, а также влиять на эффективность работы компонентов врожденного иммунитета [5, 6]. Восстановление Т-клеточного пула и нормального функционирования системы иммунореактивности в этих условиях возможно только при проведении иммунозаместительной терапии экзогенным ИЛ-2. Включение рекомбинантного ИЛ-2 (ронколейкина) в комплексное лечение ХВГ будет способствовать восстановлению иммунореактивности с последующим развитием каскада клеточно-опосредованных реакций иммунного ответа, что, возможно, приведет к снижению числа рецидивов и предотвращению прогрессирования хронического процесса с исходом в цирроз [9, 10]. Следовательно, противовирусная терапия (ПВТ) при ХВГ должна осуществляться с проведением иммунореабилитационных мероприятий, направленных, в первую очередь, на стимуляцию клеточного звена иммунной системы и процессы элиминации ЦИК. Все вышеперечисленное является патогенетическим обоснованием для включения в программу комплексной терапии ХВГ ронколейкина. Препарат ронколейкин - рекомбинантный интерлейкин-2 человека - является одним из лекарственных средств, используемых при проведении цитокинотерапии. Ронколейкин для инъекций (Roncoleukin, регистрационное удостоверение № 000122/01 - 2000) - лекарственная форма рекомбинантного интерлейкина-2 человека (rIL-2), выделенного и очищенного из клеток дрожжей Saccharomyces cerevisiae, в генетический аппарат которых встроен ген человеческого IL-2. Ронколейкин выпускают в ампулах в дозах по 1мг (1 000 000 МЕ), 0,5 мг (500 000 МЕ), 0,25 мг (250 000 МЕ) действующего начала rIL-2. Рекомбинантный интерлейкин-2 человека (rIL-2) - белок с молекулярной массой 15300 ± 200 Да. rIL-2 человека - структурный и функциональный аналог эндогенного IL-2. Цитокиновые препараты обладают замещающими и регуляторными эффектами, а способность ронколейкина клонально активировать Т- и В-составляющие адаптивного иммунитета позволяет констатировать наличие у него свойств, характерных для средств активной иммунотерапии. В организме ронколейкин и подобные ему цитокиновые препараты являются средствами как замещающего (восполняющего), так и индуктивного типа действия.

Целью настоящего исследования являлось изучение динамики концентраций молекулярных фракций ЦИК, содержания иммуноглобулинов и оценка показателей фагоцитоза на фоне комплексного лечения хронического вирусного гепатита С (ХВГС), включающего в себя традиционную противовирусную терапию (ПВТ) в составе пролонгированных интерферонов в сочетании с рибавирином и иммунокорригирующую терапию ронколейкином

Материалы и методы


Проведено комплексное клинико-лабораторное обследование 41 пациента (21 женщина и 20 мужчин) с ХВГС. Основную группу составили 19 больных, которым проводили ПВТ с ронколейкином. В группе сравнения находились пациенты (22 чел.) только с ПВТ без включения ронколейкина. Группы были сопоставимы по возрасту, полу, длительности хронического заболевания и компонентам ПВТ (пегинтерферон-α2 и рибавирин). Ронколейкин в основной группе вводили по 500 000 ЕД подкожно в плечо два раза в неделю одновременно с ПВТ курсом 8 нед. (2 мес.). Курсовая доза составила 16 инъекций. Все пациенты находились в периоде репликативной вирусной активности, установленной методом ПЦР (АмплиСенс монитор FRT, аналитическая чувствительность 300 МЕ/мл), и обследованы в соответствии с общепринятым клинико-лабораторным стандартом, включая биохимические тесты, инструментальное обследование в виде УЗИ гепатобилиарного тракта и биопсии и/или фибросканирования печени. В качестве контроля обследовали 14 практически здоровых добровольцев. Содержание иммуноглобулинов классов A, M, G в сыворотке крови измеряли методом турбодиметрии на автоматическом анализаторе белков "Turbox" (Финляндия). Концентрацию ЦИК в сыворотке крови определяли методом селективной преципитации в полиэтиленгликоле (в модификации Ю.А. Граневич). Размер ЦИК оценивали по коэффициенту К=C1/C2, где C1 и C2 - концентрации иммунных комплексов в сыворотке больного, выделенные соответственно при преципитации 4 и 3% ПЭГ. Для определения размеров ЦИК были приняты следующие критерии: комплексы считали крупными при 11,5. Для оценки состояния фагоцитарной защиты использовали определение в крови фагоцитарной активности нейтрофилов с помощью фагоцитарного индекса (ФИ) и фагоцитарного числа (ФЧ), бактерицидной активности лейкоцитов методом базального и стимулированного НСТ-теста по индексу активности нейтрофилов (ИАН). Результаты исследований рассчитывали, используя оценку среднего значения, его ошибки, коэффициент корреляции (r), критерий Cпирмена (R) и Крускала-Уоллиса (kKW), достоверность статистических показателей (р) - при помощи программы Statistica7.0 (StatSoftInc., 2004)

Результаты и обсуждение


До начала лечения в обеих группах обследованных больных отмечалось повышение количества ЦИК, в среднем в 1,7 раза по отношению к норме (р<0,01), что согласуется с литературными данными большинства исследователей (табл. 1) [1, 7, 11]. Однако наличие повышенной концентрации ЦИК в сыворотке крови больных еще не означает их участие в патогенезе заболевания. В значительной степени это зависит от размеров образующихся иммунных комплексов, определяющих дальнейшую направленность их преобразования в организме. Это повышение имело место, главным образом, за счет увеличения количества среднемолекулярных иммунных комплексов, количество которых возрастало в абсолютном исчислении в 2,2 раза по отношению к соответствующему показателю нормы (р<0,01). Количество мелкомолекулярных иммунных комплексов в абсолютном исчислении возрастало в 2,2 раза, в то время как абсолютное содержание крупномолекулярных комплексов практически не менялось. Суммарно содержание средне- и мелкомолекулярной фракций ЦИК составляло до лечения в основной группе 320,8±44,5 у.е., а в группе сравнения - 337,1±58,6 у.е. при норме 158,0±26,4 у.е. (р<0,01). После завершения лечения в основной группе больных, получавших на фоне ПВТ иммунотропную терапию ронколейкином, определено снижение уровня ЦИК до верхней границы нормы, уменьшение содержания в их составе наиболее патогенной среднемолекулярной фракции (11S - 19S). При этом содержание среднемолекулярных ЦИК в основной группе снизилось с 112,7±11,3 до 83,1±8,4 у.е. (р<0,01). В группе сравнения также имело место некоторое снижение уровня ЦИК, однако гораздо менее выраженное, чем в основной группе. Поэтому, в целом, уровень ЦИК в группе сравнения оставался после лечения в 1,4 раза выше нормы (p<0,01), а содержание наиболее патогенных среднемолекулярных комплексов - в 1,5 раза. Таким образом, использование ронколейкина в составе ПВТ ХВГС способствует нормализации общего количества ЦИК и их молекулярного состава, в то время как в группе больных, получавших только общепринятое лечение, сохранялись существенные сдвиги данных показателей, а именно повышенный уровень ЦИК, преимущественно за счет наиболее патогенной среднемолекулярной фракции.

Таблица 1. Концентрация молекулярных фракций ЦИК при ХВГС с учетом лечения (M±m) ЦИК (у.е.оп.) Контроль (n=14) Основная группа (n=19) Группа сравнения (n=22) Р
Крупные 18,5±7,8 22,1±6,5 25,7±6,8 >0,1
16,5±5,0 30,1±7,5 >0,1
Средние 53,5±9,3 112,7±11,3 121,2±10,5 >0,1
60,1±8,4 88,8±9,7 <0,05
Мелкие 104,5±17,1 208,1±33,2 215,9±48,1 >0,1
240,0±36,1 320,7±31,5 <0,01

Примечание. В числителе - показатели до начала лечения, в знаменателе - после его завершения; "р" вычислен между аналогичными показателями основной группы и группы сравнения.

В сыворотке крови обследованных больных в обеих группах до лечения достоверно увеличивалось содержание всех трех классов иммуноглобулинов (табл. 2). Более чем в 2 раза при оценке "средних" значений уровень иммуноглобулина класса М превышал показатели "средней" контрольной группы (р<0,001). Установлено достоверное повышение уровня IgG. Наибольшей выраженности у наблюдаемых больных достигала продукция IgА (р<0,001). Полученные результаты согласуются с литературными данными отечественных и зарубежных авторов и свидетельствуют об активации гуморального звена иммунитета у исследуемой группы пациентов [6, 7]. При проведении корреляционного анализа была установлена обратная взаимосвязь между уровнем крупномолекулярной фракции ЦИК и концентрацией IgA (-0,65, p<0,001) при меньшей зависимости образования указанной фракции ЦИК от содержания IgM (-0,26) и IgG (-0,32). Выявленная активация гуморального иммунитета при хронической инфекции, по-видимому, отражает особенности взаимодействия макроорганизма с антигеном, характеризующимся слабовыраженной иммуногенностью. Данное положение легло в основу для проведения иммунореабилитации на фоне этиотропной терапии интерферонами ХВГС. Изменений концентрации IgG после лечения в обеих группах выявлено не было. Так, уровень IgG в сыворотке крови пациентов основной группы до начала лечения составил 12,90±0,50 г/л, что превышало уровень средненормальных показателей (10,00±0,27 г/л, p<0,001). После применения ронколейкина с противовирусным лечением исследуемый показатель значимо не менялся и составил 13,90±0,60 г/л (p>0,05). Однако наблюдалась обратная взаимосвязь уровня IgG в сыворотке крови от содержания ЦИК патогенной среднемолекулярной фракции (-0,45; p<0,001). У пациентов основной группы выявлена нормализация концентрации IgА с 2,60±0,30 до 1,08±0,09 г/л (p<0,001) и тенденция к снижению концентрации IgM в сыворотке крови, при этом нормальные значения достигнуты не были.

Таблица 2. Содержание иммуноглобулинов и концентрация ЦИК при ХВГС в зависимости от лечения (M±m) Показатель Контроль (n=14) Основная группа (n=19) Группа сравнения (n=22)
До лечения После лечения До лечения После лечения
ч/з 2 нед. ч/з 3 мес. ч/з 2 нед. ч/з 3 мес.
Ig M, г/л 1,04 ± 0,02 1,78 ± 0,09 p < 0,001 2,09±0,11 p < 0,001 p1 > 0,05 1,3±0,14 p < 0,05 p1< 0,001 1,80±0,08 p < 0,001 2,01±0,11 p < 0,001 p1> 0,05 p2 > 0,05 2,01±0,24 p < 0,001 p1 > 0,05 p2< 0,001
Ig A, г/л 1,08 ± 0,02 2,60 ± 0,20 p < 0,001 2,60±0,30 p < 0,001 p1 > 0,05 1,08±0,09 p > 0,05 p1< 0,001 2,90±0,20 p < 0,001 3,10±0,31 p < 0,001 p1 > 0,05 p2 > 0,05 2,60±0,40 p < 0,001 p1 > 0,05 p2< 0,001
Ig G, г/л 10,00 ± 0,27 12,90±0,50 p < 0,001 13,90±0,60 p < 0,001 p1 > 0,05 14,40±0,90 p < 0,001 p1> 0,05 12,60±0,30 p < 0,001 12,80±0,80 p < 0,001 p1 > 0,05 p2 > 0,05 9,80±0,60 p < 0,001 p1< 0,001 p2< 0,001
ЦИК (у.е.оп.) 61,0 ± 2,6 106,1±5,9 p <0,05 104,5±6,3 p <0,05 p1>0,05 105,6±8,6 p <0,05 p1>0,05 105,7±6,1 p <0,05 138,7±8,8 p <0,001 p1< 0,001 p2< 0,001 250,3±9,1 p < 0,001 p1< 0,001 p2< 0,001

Примечания. p -различия с контролем; р1 - различия до и после лечения; р2 - различия после лечения между группами.



Таблица 3. Состояние некоторых показателей врожденного иммунитета при ХВГС на фоне лечения (M±m) Показатель Основная группа (n=19) Группа сравнения (n=22) Р
Фагоцитарная активность нейтрофилов, % 48,01±3,00 50,70±3,52 >0,1
51,01±2,82 52,40±3,14 >0,1
Фагоцитарный резерв, у.е. 0,98±0,12 0,97±0,18 >0,1
1,53±0,09 0,99±0,19 <0,05
НСТ тест, % 7,30±0,09 7,50±0,18 >0,1
10,00±0,50 6,50±0,89 <0,01
Резерв НСТ теста, у.е. 1,90±0,05 1,79±0,11 >0,1
2,60±0,02 1,60±0,33 <0,01
Индекс активации нейтрофилов, у.е. 2,11±0,04 2,06±0,09 >0,1
3,10±0,02 2,10±0,06 <0,05

Примечание. В числителе - показатели до начала лечения, в знаменателе - после его завершения; "р" вычислен между аналогичными показателями основной группы и группы сравнения.

При изучении фагоцитарной активности нейтрофилов достоверных различий до и после лечения ронколейкином выявлено не было (табл. 3). По современным данным, сведения о спонтанном и стимулированном НСТ-тесте, а также характеристиках фагоцитарного резерва являются одними из наиболее важных показателей состояния врожденного иммунитета, в частности, функциональной активности и резервного потенциала фагоцитов. Наши исследования показали, что отмечено иммуномодулирующее влияние ронколейкина на фагоцитарное звено у пациентов с ХВГС (достоверно увеличился резерв нейтрофилов). Наблюдалось увеличение резерва НСТ (p<0,01) и индекса активации нейтрофилов (p<0,05) у пациентов на фоне лечения ронколейкином, что указывает на повышение резервных метаболических возможностей нейтрофильных гранулоцитов и усиление микробоцидной активности внутриклеточных процессов.

Выводы


Таким образом, применение иммунокоррекции с использованием ронколейкина в сочетании с противовирусным лечением ХВГС патогенетически обосновано и должно способствовать в дальнейшем повышению эффективности противовирусной терапии, что является целью нашего исследования в перспективе. Использование ронколейкина в составе комплексного лечения ХВГС определяет возможность создания новых оригинальных протоколов лечения.

Литература


1. Агапитова С.В., Черных Е.Р., Леплина О.Ю. и др. Характеристика иммунных дисфункций у пациентов с хроническими вирусными гепатитами и циррозом печени // Сибирский мед. журнал. - 2008. - Т. 2, № 3. - С.79
2. Арямкина О.Л. Хроническая HBV- и HCV- инфекция и рак печени: клинико-эпидемиологические и дифференциально-диагностические параллели // Эпидемиология и инфекционные болезни. - 2006. - № 2. -С. 36-39.
3. Ивашкин В.Т. Механизмы иммунной толерантности и патологии печени // Рос. журн. гастроэнтерол., гепатотол., колопроктол. - 2009. - № 2. - С. 8 - 13.
4. Каминский Ю.В., Скляр Л.Ф., Маркелова Е.В. Клинико-морфологические и иммунологические параллели при хронических вирусных гепатитах // Тихоокеанский мед. журнал. - 2005. - № 1. - С. 17-20.
5. Кетлинский C.А., Симбирцев А.С. Цитокины. - СПб.: Фолиант, 2008. - С. 375
6. Малый В.П., Гололобова О.В. Особенности функционирования иммунной системы при хроническом гепатите С // Международный мед. журнал. - 2007. - № 2. - С. 58-62.
7. Нагоев Б.С., Понежева Ж.Б. Некоторые аспекты иммунопатологии при хронических гепатитах // Эпидемиология и инфекционные болезни. - 2009. - С. 45-49.
8. Плехова Н.Г., Сомова Л.М. Роль моноцитов/макрофагов в патогенезе вирусных инфекций // Тихоокеанский мед. журнал. - 2010. - № 3. - С. 5-9.
9. Скляр Л.Ф., Маркелова Е.В., Полушин О.Г. и др. Хроническая HCV-инфекция: современные иммуноморфологические аспекты: монография [под ред. Ю.В. Каминского] - М.: РУДН, 2006. - С. 213.
10. Соболевская О.Л., Корочкина О.В. Клиническое значение Т-клеточной реакции лимфоцитов на антигены вирусов гепатита В и С и уровня цитокинов при противовирусной терапии больных гепатитом С и микст-инфекцией (В+С) // Клин. медицина. - 2007. - № 7. - С. 63-66.
11. Собчак Д.М., Корочкина О.В. Оценка показателей Т-клеточного иммунитета и медиаторов иммунного ответа у больных хроническим гепатитом С // Эпидемиология и инфекционные болезни. - 2007. - № 2. - С. 37-42

Аннотация:

Противовирусная терапия при хроническом вирусном гепатите С должна осуществляться с проведением иммунореабилитационных мероприятий, направленных, в первую очередь, на стимуляцию клеточного звена иммунной системы и процессы элиминации циркулирующих иммунных комплексов. В данной работе изучалась динамика концентраций молекулярных фракций циркулирующих иммунных комплексов, содержания иммуноглобулинов и оценка показателей фагоцитоза на фоне комплексного лечения хронического вирусного гепатита С, включающего в себя традиционную противовирусную терапию в составе пролонгированных интерферонов в сочетании с рибавирином и иммунокорригирующую терапию ронколейкином. Использование ронколейкина в составе комплексного лечения ХВГС определяет возможность создания новых оригинальных протоколов лечения. Хроническая вирусная инфекция характеризуется постоянным наличием антигена в организме, что, соответственно, приводит к повышению образования циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК). Снижение реактивности клеточного звена адаптивного иммунитета может совпадать с понижением функциональной активности фагоцитирующих клеток, что, в свою очередь, также ведет к увеличению уровня ЦИК. Известно, что макрофаги и нейтрофильные гранулоциты являются ключевыми клетками, участвующими в утилизации иммунных комплексов из периферической крови.

Авторы:

Скляр Л.Ф.
Маркелова Е.В.
Ли Ю.А.
Горелова И.С.

Издание: Дальневосточный медицинский журнал
Год издания: 2012
Объем: 4с.
Дополнительная информация: 2012.-N 4.-С.26-29. Библ. 11 назв.
Просмотров: 111

Рубрики
Ключевые слова
C
cd
cd3+
cd4
абсолютный
адаптивное
активация
активность
антиген
антигенный
аутоиммунные
в-клеточная
в-лимфоциты
вирусные
возможности
вторичные
гепатит
гепатология
гранулоцитов
данных
двойная
динамика
дополнительная
другому
заболевания
иммунизация
иммунитет
иммунная
иммуноглобулин
иммунодефицит
иммунокорригирующий
иммунология
иммунопатология
иммунореабилитация
иммунотерапия
иммунотропные
интерферон
инфекцией
использование
клетка
клеток
клеточная
ключ
количество
компенсаторный
комплекс
комплексная
концентрация
крови
лечение
лимфопролиферативные
лимфоцит
макрофаг
малого
мероприятия
механизм
молекулярная
нагрузка
наличия
направленный
негативное
недостаточность
независимые
нейтрофильные
новые
образование
организм
основа
относительная
оценка
пациент
первая
периферическая
повышение
показатели
постоянная
проведение
пролонгированная
противовирусная
противовирусные
протоколы
процесс
работа
реабилитация
реактивность
реакцией
рибавирин
роль
ронколейкин
связанные
систем
слова
снижение
содержание
создание
состав
средства
стимуляци
т-клеточная
терапия
традиционная
увеличение
уровни
усиление
утилизация
участники
фагоцитирующая
фагоцитоз
фактор
фоновое
формирование
фракция
функциональная
характер
хроническая
хронически
хронический
циркулирующие
элиминации
этиология
эффект
Ваш уровень доступа: Посетитель (IP-адрес: 18.191.200.114)
Яндекс.Метрика