МЕТОДИКА ОЦЕНКИ СПЕЦИФИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ ГЕННО-ИНЖЕНЕРНЫХ ПРЕПАРАТОВ Г-КСФ, ИНТЕРФЕРОНОВ АЛЬФА,БЕТА И СОМАТОТРОПИНА IN VITRO

Аннотация:

В последние годы отечественными компаниями начат выпуск ряда генно-инженерных белков - цитокинов и гормонов, которые ранее поступали на рынок от зарубежных производителей. При этом одним из условий регистрации препарата является оценка активности белка биологическим методом, так как такой распространенный и точный метод определения количества белка в пробе, как иммуноферментный, может не заметить небольших отличий в пространственной организации молекул человеческого белка и белка, синтезированного в бактериальных клетках. Эти отличия, однако, могут уменьшать биологическую активность белка, в связи с чем производимые лекарственные препараты должны быть охарактеризованы по показателю специфической активности, которая в идеале должна быть сравнена с активностью соответствующего международного стандарта ВОЗ. Определение активности может выполняться как in vivo, так и in vitro. При этом в первом случае специфическая активность белка тестируется на животных по выполнению белком той же функции, ради которой его, собственно говоря, и производят. В системах in vitro оценка специфической активности полученного белка может производиться по критериям, не имеющим ничего общего с его функцией в организме, но которые, тем не менее, позволяют адекватно оценивать действие данного белка на человека (примером является оценка активности гормона соматотропина по стимулированию роста клеток Nb-2 лимфомы крыс in vitro). Предмет данного сообщения - рассмотрение собственного опыта оценки специфической активности, включая статистическую обработку результатов тестирования, четырех генно-инженерных белков: трех цитокинов - гранулоцитарного коло-ниестимулирующего фактора (Г-КСФ) и интерфе-ронов альфа и бета, и одного гормона - соматотропина. Все эти белки как лекарственные препараты являются дженериками, так что тот или иной вариант определения их специфической активности уже имеется у зарубежных компаний-производителей, но особенности использования этих методов в доступных публикациях отсутствуют. Кроме того, выяснилось, что имеющиеся в открытых источниках описания методов оценки биологической активности некоторых генно-инженерных белков не удается воспроизвести при простом копировании; возможно, в статьях были опущены какие-то существенные подробности. Разработана простая и хорошо воспроизводимая методика оценки in vitro специфической активности нескольких генно-инженерных белков - филграстима (чрГ-КСФ), интерферонов альфа и бета, и соматотропина, включающая программу автоматической статистической обработки результатов, соответствующую требованиям Европейской Фармакопеи VII. Методика основана на угнетении или стимулировании роста клеток определенных линий и используется при тестировании отечественных и импортируемых субстанций и лекарственных препаратов.

Авторы:

Издание: Российский биотерапевтический журнал
Год издания: 2012
Объем: 4с.
Дополнительная информация: 2012.-N 3.-С.29-32. Библ. 15 назв.
Просмотров: 412