СПОСОБ ВЫДЕЛЕНИЯ ИНТАКТНЫХ МОЛЕКУЛ ТАЙТИНА (КОННЕКТИНА) ИЗ СЕРДЕЧНОЙ МЫШЦЫ МЛЕКОПИТАЮЩИХ

Аннотация:

Для выделения тайтина из сердечной мышцы млекопитающих (кролика и суслика) был применен подход, с помощью которого ранее были получены миофибриллы с интактными полосами локализации минорных белков в А-диске саркомеров. Перед гомогенизацией мышечная ткань инкубировалась в течение 2—3-х недель при 4° в Са2+-связывающем растворе для снижения активности Са2+-зависимых протеаз. После гомогенизации мышцы тайтин выделяли по методу Сотериоу с соавт. В контрольных экспериментах вьщеление тайтина проводилось из мышечной ткани, которая не инкубировалась в Са2+-связывающем растворе. В ряде случаев контрольные препараты тайтина содержали только Т2-фрагменты, однако в большинстве случаев, наряду с Т2, они содержали 5—20% его N2B-изoфopмы. С помощью нашего метода получены препараты тайтина сердечной мышцы кролика, которые, наряду с Т2, содержали 30-50% N2B- и N2ВА-изоформ этого белка. Обнаружено увеличение содержания а-структуры в препаратах тайтина, полученных этим методом. Выявлена более высокая АТРазная активность актомиозина in vitro в присутствии тайтина, препараты которого содержали больше интактных молекул. Этот результат подтверждает важную роль тайтина в регуляции актин-миозинового взаимодействия в мышце. Использованный в этой работе подход к сохранению тайтина может быть применен для выделения других белков, которые являются субстратами Са2+-зависимых протеаз.

Авторы:

Издание: Биохимия
Год издания: 2013
Объем: 10с.
Дополнительная информация: 2013.-N 5.-С.600-609. Библ. 41 назв.
Просмотров: 43