СОВРЕМЕННЫЕ МЕТОДЫ ВЫЯВЛЕНИЯ AHTИ-HLA АНТИТЕЛ В ОБЕСПЕЧЕНИИ БЕЗОПАСНОСТИ ГЕМОТРАНСФУЗИЙ

Аннотация:

Вопросы, связанные с обеспечением безопасности гемотрансфузии, остаются одними из самых важных в клинической и лабораторной медицине. В терапии кровотечений, анемий и хирургических вмешательств широко применяются трансфузии крови или ее компонентов, что может способствовать развитию связанного с трансфузией острого повреждение легких (TRALI) . Количество регистрируемых во всем мире случаев острого посттрансфузионного повреждения легких ежегодно увеличивается и по данным FDA (Управление США по надзору за качеством пищевых продуктов и лекарственных средств) TRALI стало ведущей причиной посттрансфузионной летальности.В России истинная распространенность TRALI не известна. В основе патофизиологии развития острого повреждения легких лежит две модели: ан-титело-опосредованная и биологически активных липидов . Возникновение TRALI связывают с наличием в переливаемых компонентах крови донора, прежде всего, специфических антител к антигенам HLA (Human leucocytes antigen) I и II классов. Кроме того, развитие данной патологии возможно обусловлено взаимодействием антител донора с антигенами системы HNA (Human Neutrophil Antigen, HNA-la, HNA-lb, HNA-lc и HNA-2), экс-прессированными на поверхности лейкоцитов реципиента. Появление антилейкоцитарных антител чаще всего является следствием предшествующих многократных трансфузий и сенсибилизации во время беременности.Повышение иммунологической безопасности гемотрансфузий обеспечивается обследованием всей донорской крови на антитела к антигенам системы HLA. В отечественной медицинской литературе данному вопросу посвящены немногочисленные публикации, поэтому исследование лейкоцитарных антител с помощью современных методов является актуальным и интересным. В настоящее время широко применяется классическое определение антител с помощью лимфоцитотоксического теста, но внедрение таких современных технологий мультиплексного анализа, как Luminex, открывает новые возможности в выявлении антилейкоцитарных антител.В данном исследовании мы сравнили встречаемость и распределение HLA антител с помощью твердофазного иммуноферментного метода и проточной цитометрии. Материалы и методы. В исследовании использован новый метод мультиплексного анализа на платформе Luminex, который позволяет одновременно определять несколько мишеней (аналитов) в одном образце. В этом методе используют полистироловые микросферы, несущие на своей поверхности антигены HLA, к которым добавляют исследуемую сыворотку. В состав микросфер интегрированы два флуорофора в различной концентрации. В случае наличия в сыворотке антител на поверхности микросфер образуется комплекс антиген-антитело, затем в систему вносят конъюгат (анти-IgG человека, меченные фикоэритрином). Измерение проводят с помощью проточного анализатора Luminex. Исследовано 200 образцов сывороток доноров женского пола (средний возраст 43,6 лет), которые были объединены в три группы: без беременностей в анамнезе, с 1-3 беременностями, 4 и более беременностей, а также 100 сывороток доноров мужского пола без трансфузий в анамнезе (средний возраст 46 лет). Тестирование проводили одновременно методом твердофазного иммуноферментного анализа (ELISA) с использованием тест-системы Elisa kit QuikScreen (GTI, USA) для I класса антител и B-Screen (GTI, USA) для II класса и методом проточной цитометрии с помощью Luminex LifeScreen Deluxe (Gen-Probe, USA) в соответствии с инструкцией производителя. Для подтверждения положительных результатов использовали тест-системы LIFECODES Class I ID и LIFECODES Class II ID (Gen-Probe, USA).

Авторы:

Издание: Вестник службы крови России
Год издания: 2013
Объем: 3с.
Дополнительная информация: 2013.-N 2.-С.47-49. Библ. 7 назв.
Просмотров: 212