Диагностические возможности методов иммуногистохимии при гистологическом исследовании сердца

Аннотация:

Предложен ряд иммуногистохимических маркеров и протоколов их выявления, позволяющих расширить диагностические возможности гистологического исследования сердца при его повреждениях и внезапной сердечной смерти. Гистологическое исследование сердца в судебно-медицинской практике является одним из наиболее важных при его повреждениях, причиняемых тупыми и острыми предметами, а также приобретает первостепенное значение в диагностике внезапной сердечной смерти. В этих случаях у экспертов нередко возникают затруднения в определении достоверности спазма мелких артерий, характеристике популяций различных клеток, а также в определении давности реактивных изменений в миокарде в ответ на причиненное повреждение. Рекомендованные приказом Министерства здравоохранения и социального развития РФ №346н от 12.05.2010 обзорные методы окраски (гематоксилином и эозином, по Ван-Гизону, Маллори) часто не позволяют четко дифференцировать на препаратах различные популяции клеток соединительной ткани, среди которых тучные клетки имеют наиболее важное значение. Расширить диагностические возможности гистологического исследования позволяет использование методов иммуногистохимии, которые постепенно внедряются в судебно-медицинскую практику как за рубежом, так и в России . Однако в связи с обилием иммуногистохимических маркеров и сложностью адаптации новых методов для судебно-гистологического материала сохраняются определенные затруднения при подборе наиболее эффективных и информативных маркеров. Цель настоящего исследования — подбор иммуногистохимических маркеров, позволяющих расширить диагностические возможности гистологического исследования сердца, и разработке протоколов иммуногистохимических реакций, выполняемых в условиях гистологического отделения бюро судебно-медицинской экспертизы (СМЭ). Материалом для исследования служили фрагменты миокарда левого желудочка людей, погибших от различных причин (л=15). В настоящем исследовании использован архивный материал СПб ГБУЗ «Бюро судебно-медицинской экспертизы», взятый в рамках плановой аутопсии для гистологического исследования, фиксированный в 10% растворе формальдегида, обезвоженный с использованием тканевого процессора Leica TP 1020 и залитый в парафин стандартным образом. Срезы толщиной 7 мкм изготавливали на ротационном микротоме PFM Rotary 2003 (PFM, Германия). Использовали предметные стекла Menzel (Германия) с адгезивным покрытием на основе бычьего сывороточного альбумина и предметные стекла, покрытые полилизином (polysine, «Menzel», Германия). С использованием иммуногистохимических маркеров (антител) выявляли тучные клетки, миофибриллы кардиомиоцитов, гладкие миоциты в составе стенок кровеносных сосудов, макрофаги, эндотелиоциты сосудов и нервные волокна. В каждом случае проводили подбор оптимальных условий обработки различными реагентами, определяли необходимость проведения дополнительных этапов обработки (различных блокировок и теплового демаскирования антигенов) и осуществляли подбор наиболее эффективных систем визуализации продуктов иммуногистохимической реакции.

Авторы:

Издание: Судебно-медицинская экспертиза
Год издания: 2013
Объем: 4с.
Дополнительная информация: 2013.-N 4.-С.37-40. Библ. 9 назв.
Просмотров: 129