ОСОБЕННОСТИ ТРАНСФЕКЦИИ И ЭКСПРЕССИИ кДНК ГЕНА ДИСТРОФИНА ЧЕЛОВЕКА, ДОСТАВЛЕННОГО В МЫШЦЫ МЫШЕЙ mdx С ПОМОЩЬЮ СИНТЕТИЧЕСКИХ МИКРОСФЕР МF-2

Аннотация:

На криостатных срезах проанализировано число дистрофин-положительных мышечных волокон (ДПМВ) в различных скелетных мышцах мышей mdx после однократной иньекции в четырехглавую мышцу бедра искусственных полимерных микросфер МF-2, содержащих экснрессирующую конструкцию pHSADy с полноразмерной кДНК гена дистрофина человека. При использовании дозы кДНК 25 мкг на инъекцию число ДПМВ чере.1, 7.21 и 60 дней составило в мышце сведения 1, 2,4, 5.8 и 4,8% соответственно; через 7, 21 и 60 .дней в одноименном мышце контрлатеральной лапы - 2.1, 4.3 и 1% соответственно и в ягодичной мышце -5,5, 8.4 и 1%, соответетвенно. Показан синтез полноразмерного(427 кДа) белка- дистрофина человека в мышцах мышей mdx после трансфекции. Наличие введеннои конструкции в скелетных мышцах, сердце, мозге, легких и у плодов доказано ПЦР. Методом FISH с использованием в качестве ДНК-зонда биотинмеченной конструкции рHSADу через 7 дней после введения установлено наличие МF-2 микросфер в 70% ядер мышечных волокон в месте введения, в 64% ядер ягодичной мышцы и в 62% ядер контрлатералыой четырехглавой мышцы. Через 21 день после инъекции эти показатоли ровнялись 41,29 и 45% соответственно, Наличие МF-2 микросфер зарегистрировано в ядрах клетогк крови, мозга, сердца, легких, а также в плаценте и тканях плодов 18-го дня развития. Полученные результаты свидетельствуют о высокой эффективности доставки экснресеирующих генных конструкций у ядра клеток с помощью микросфер МF-2, их длительной внутриядерной персистенции и сохранении способности к экспрессии в течение по крайней мере двух месяцев после введения. МF-2 микросферы представляют несомненный интерес для направленной доставки генных конструкцтй в ядра клеток.

Авторы:

Издание: Генетика
Год издания: 1999
Объем: 6с.
Дополнительная информация: 1999.-N 1.-С.22-27
Просмотров: 24