Проведение биопсии эмбрионов человека на стадии компактной морулы повышает диагностическую надежность преимплантационного генетического скрининга (ПГС) и обеспечивает высокую частоту наступления беременности (по данным 215 циклов ЭКО-ИКСИ с ПГС)

Аннотация:

Впервые продемонстрирована возможность проведения биопсии на стадии компактной морулы, что позволяет получить достаточный объем клеточного материала для генетической диагностики любым общепринятым способом. Механическая травматизация изъятых клеток минимальна, что значительно облегчает процесс фиксации ядер для проведения FISH анализа. Интервал между проведением биопсии и получением результата исследования достаточен для того, чтобы осуществить перенос эмбрионов на 5—6-е сутки развития в текущем цикле ЭКО. После биопсии практически все исследуемые эмбрионы достигают стадии бластоиисты, а частота наступления беременности сопоставима с эффективностью программы ЭКО без ПГД, что говорит об отсутствии негативного влияния биопсии на стадии компактной морулы на развитие эмбрионов человека как in vitro, так и in vivo. Ключевые слова: биопсия, компактная морула, ПГЛ, ПГС, FISH. Преимплантационная генетическая диагностика (ПГД) уже давно стала рутинной процедурой во многих клиниках ЭКО по всему миру. В тех случаях, когда пациент является носителем генной или хромосомной аномалии, ПГД становится неотъемлемой частью программы ЭКО. Стремительному развитию ПГД в настоящее время способствует внедрение в эмбриологическую практику современных молекулярных методов анализа ДНК: сравнительной геномной гибридизации (CGH) , секвенирования , полимеразной цепной реакции (ПЦР) с гибридизационно-флюоресцентной детекцией . Использование данных технологий в целях ПГД наряду с общепринятым FISH и ПЦР с электрофо-ретической детекцией расширяет возможности исследования генетического статуса эмбрионов человека, полученных in vitro. Независимо от того, какой метод молекулярного анализа используют для ПГД, исследование проводят на материале ДНК одной или нескольких эмбриональных клеток. Первые работы , в которых была продемонстрирована биопсия клеток у эмбрионов человека в целях генетической диагностики, выполнены на 3-й сутки раннего развития, когда эмбрион состоит из 6—8 клеток (стадия дробления). Биопсия бластомеров на восьмиклеточной стадии и сейчас является наиболее распространенной и широко практикуемой во многих лабораториях мира . Тем не менее в настоящее время уже стали очевидными преимущества биопсии клеток трофэкто-дермы бластоцист (5-е сутки развития) по сравнению с биопсией бластомеров на стадиях дробления (3-й сутки развития) . В первую очередь при биопсии клеток у бластоцист возможно получение большего объема клеточного материала для исследования, чем при биопсии на стадиях дробления, когда количество изъятого материала ограничено 1—2 клетками . Увеличение числа эмбриональных клеток, полученных в результате биопсии, упрощает проведение генетического анализа, повышает достоверность результата и позволяет выявить хромосомные и генные нарушения, используя методы, основанные на ПЦР или FISH . Другим преимуществом биопсии на 5-е сутки развития является то, что исследуют эмбрионы, достигшие стадии бластоцисты. Эмбрионы на данной стадии успешно прошли первый этап клеточной дифференцировки, который морфологически выражен в процессах компактизации и кавитации, и обладают наиболее высоким потенциалом к имплантации . В ряде современных работ было показано, что частота выявленных анеуплои-дий у бластоцист достоверно ниже, чем у дробящихся эмбрионов. Несмотря на очевидные преимущества биопсии трофэктодермы бластоцисты на 5-е сутки развития, этот подход имеет существенный недостаток: время для осуществления диагностики ограничено сроками проведения переноса эмбрионов (embryo transfer) и составляет интервал от нескольких часов до одних суток. Данное обстоятельство может являться причиной отмены переноса эмбрионов в текущем цикле ЭКО, криоконсервации бластоцист

Авторы:

Издание: Проблемы репродукции
Год издания: 2013
Объем: 7с.
Дополнительная информация: 2013.-N 4.-С.75-81. Библ. 48 назв.
Просмотров: 395