БИОСИНТЕЗ ТРАНСМЕМБРАННОГО ФОТОПРЕОБРАЗУЮЩЕГО БЕЛКА [2Н]БАКТЕРИОРОДОПСИНА, МЕЧЕННОГО ДЕЙТЕРИЕМ ПО ОСТАТКАМ АРОМАТИЧЕСКИХ АМИНОКИСЛОТ [2,3,4,5,6-2Н5]РНЕ, [3,5-2H2]TYR И [2,4,5,6,7-2H5]TRP

Аннотация:

Разработан метод микропрепаративного синтеза фотопреобразующего трансмембранного белка бактериородопсина (выход 8...10 мг), меченного дейтерием по остаткам функционально важных аминокислот - [2,3,4,5,6-2H5]Phe, [3,5-2Н2]Туг и [2,4,5,6,7-2Н5]Trp, что важно для наноиндустрии новых современных отечественных фотопреобразующих наноматериалов и биомолекулярной электроники. Белок выделен из мембран экстремальных фотоорганогетеротрофных галобактерий Halobacterium haloblum лизисом клеток в дистиллированной воде, обработкой клеток ультразвуком при 22 кГц, спиртовой экстракцией низко- и высокомолекулярных примесей, клеточной РНК, каротиноидов и липидов, с последующей солюбилизацией конечного продукта 0,5 %-ным додецилсульфатом натрия (ДДС-Na) и фракционированием метанолом. Гомогенность синтезируемого ^Н-меченого бактериородопсина и селективность включения дейтерия в молекулу исследованы комбинацией методов разделения и анализа белка, включая электрофорез в 12,5 %-ном полиакриламидном геле (ПААГ) с 0,1 %-ным ДДС-Na, гель-проникающую хроматографию на сефадексе G-200, обращенно-фазовую ВЭЖХ, масс-спе1строметрию электронного удара (ЭУ) метиловых эфиров Н-(диметиламино)нафтален-1-сульфонил хлоридных (дансильных) производных аминокислот.

Авторы:

Издание: Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии
Год издания: 2013
Объем: 12с.
Дополнительная информация: 2013.-N 8.-С.29-40. Библ. 20 назв.
Просмотров: 36