Полифосфаты и экзополифосфатазная активность дрожжей Saccharomyces cerevisiae при сверхэкспрессии гомо- и гетерологичных генов PPNI

Аннотация:

Для изучения роли экзополифосфатазы PPNI в метаболизме неорганических полифосфатов у грибов получены штаммы Saccharomyces cerevisiae, трансформированные векторами экспрессии дрожжевого гена PPNI и ортологичного ему гена PPN1 гриба Acremonium chrysogenum, продуцента цефалоспорина С. Экспрессия генов PPN1 в дрожжах осуществлялась под контролем сильного конститутивного промотора гена глицеральдегид-З-фосфат дегидрогеназы S. cerevisiae в составе специализированного вектора PMBI. Векторами со встроенными генами HHNI трансформировали штамм дрожжей с инактивированным геном PPNI. В результате у штамма, трансформированного вектором, содержащим дрожжевой ген PPNI, экзополифосфатазная активность увеличилась в 28 и 11 раз по сравнению с исходным мутантным и родительским штаммами, а содержание полифосфатов уменьшилось втрое. У штамма, трансформированного ортологом PPNI из А. chrysogenum, не обнаружено ни увеличения экзополифосфатазной активности, ни изменений содержания полифосфатов, что свидетельствует об отсутствии активной формы гетерологичного белка.

Авторы:

Издание: Биохимия
Год издания: 2013
Объем: 9с.
Дополнительная информация: 2013.-N 8.-С.1201-1209. Библ. 27 назв.
Просмотров: 46