ГЕТЕРОЛОГИЧНАЯ ЭКСТРАЦЕЛЛЮЛАРНАЯ ЭКСПРЕССИЯ И ХАРАКТЕРИСТИКА ПЕРОКСИСОМАЛЬНОЙ КАТАЛАЗЫ ИЗ МЕТИЛОТРОФНЫХ ДРОЖЖЕЙ Hansenula polymorpha

Аннотация:

Каталаза расщепляет Н2О2 в клетках и снижает токсичность перекисных соединений. Ген каталазы HpCATl из метилотрофных дрожжей Hansenula polymorpha за исключением части, кодирующей сигнальный пептид, был клонирован в экпрессирующий вектор pYM3165 и методом электропорации встроен в геном Pichia pastoris GSl 15. В результате анализа активности фермента и электрофореза в ПААГ с Na-ДДС было показано, что рекомбинантный белок (HpCATl) из Н.polymorpha экпрессировался в Р. pastoris. Внеклеточную каталазу Р. pastoris GS\\5 выделяли из супернатанта культуры, осаждали высаливанием (N1^4)2804 и проводили аффинную хроматографию на Ni-NTA. Исследованы основные биохимические свойства рекомбинантного белка HpCATl, температурный и рН-оптимумы, термостабильность, рН-стабильность, а также чувствительность к ионам металлов и химическим веществам. При использовании Н2О2 в качестве субстрата HpCATl оптимальные значения рН и температуры были ~2.6 и 45°С, соответственно.

Авторы:

Издание: Прикладная биохимия и микробиология
Год издания: 2013
Объем: 9с.
Дополнительная информация: 2013.-N 5.-С.504-512. Библ. 35 назв.
Просмотров: 39